начають за ингибированию холінестерази або карбоксилестерази; сірковмісні інгібітори, різні феноли - за допомогою пероксидази; по ингибированию світіння бактеріальної люціферази визначають інсектициди: ДДТ, пентахлорфенол. Для визначення фунгіцидів та інсектицидів в плодах, ягодах, листках застосовують папаїн, ацетилхолінестеразою.
2. 3. Визначення неорганічних сполук
Ферментатівниє методи успішно застосовують для чутливого і селективного визначення іонів металів, неорганічних аніонів, пероксиду водню, кисню, розчиненого у воді. Багато іони металів (наприклад, Ag, Cu, Hg, Zn, Bi, Cd) можна визначати із застосуванням ферментів в кількостях, недоступних визначенню з допомогою більшості фізико-хімічних методів аналізу. Так, із застосуванням лужної фосфатази розроблено метод визначення нанограммових кількостей берилію. За інгібірує, на алкогольдегідрогеназу можливо визначати іони срібла в концентрації 10 пг/мл. Запропоновані методи визначення ртуті по інгібірує, на пероксидазу і уреазу є одними з найбільш чутливих методів. Важливо відзначити, що наведені методи не є тільки високочутливими, а й селективними. Зазвичай ж методи, засновані на ингибирующем або ініціюють дії іонів металів на фермент, що не відрізняються високою селективністю. Однак вибірковість методів можна підвищити при використанні звичайних для аналітичної хімії прийомів маскування.
Найбільш чутливими і селективними є ферментативні методи визначення іонів металів за реактивації апофермента (білкової частини ферменту). Так, для визначення цинку і кальцію використана реактивація апофермента, отриманого видаленням іонів цинку з лужної фосфатази. Чутливий і селективний метод визначення міді заснований на реактивації апофермента, отриманого діалізом иммобилизованной поліфенолоксідази.
Для визначення аніонів, таких, як CN-, найчастіше використовують ферментні електроди, що дозволяють проводити експресний аналіз складних промислових і біологічних об'єктів. Як правило, у ферментних електродах застосовують іммобілізовані ферменти. Найчастіше аніони є субстратами в тих ферментативних реакціях, які покладені в основу методів їх визначення. Межі виявлення аніонів при використанні ферментних електродів зазвичай вище 10 мкМ. Слід особливо виділити високочутливі методи визначення таких фізіологічно активних аніонів, як CN-, I-, S2 -, F -, засновані на їх реактивує дії на інвертазу, інгібувати ртуттю або сріблом (з межами виявлення 0,2-10 нг/мл), а також на інгібірує, на пероксидазу і кислу фосфатазу.
Визначення інших неорганічних сполук - аміаку, кисню, діоксиду сірки, пероксиду водню засноване на тому, що вони є субстратами багатьох ферментів і, отже, можуть бути визначені за їх допомогою.
Розширенню застосування ферментів в аналітичній хімії сприяють подальший розвиток ензимології, розробка нових способів стабілізації ферментів, виділення і дослідження нових ферментів.
ГЛАВА 3. ПРИКЛАДИ ВИКОРИСТАННЯ КІНЕТИЧН...
