овний мозок лабораторного тварини. p align="justify"> а. Витяг фосфатидилхолін з тканини мозку. Метод заснований на екстракції гарячим етанолом фосфатидилхолін з мозку, осадженні їх ацетоном і гідролізі в середовищі з гідроксидом натрію на складові частини (жирні кислоти, гліцерин, холін і фосфорна кислота). p align="justify"> Хід визначення. Поміщають наважку 1 г тканини мозку в ступку і ретельно розтирають з 2-3 г гіпсу до отримання густої кашки. Кашку розподіляють тонким шаром на скляній платівці за допомогою скальпеля і висушують в сушильній шафі при 60? З насухо. p align="justify"> Суху масу зіскоблюють зі скла скальпелем в суху ступку, розтирають і потім переносять у суху пробірку. Доливають 5 мл етанолу, пробірку закривають пробкою із зворотним холодильником (скляна трубка довжиною 70-80 см). Пробірку ставлять у водяну лазню і нагрівають 10-15 хв при 70? С (для екстракції). p align="justify"> Потім спиртовий екстракт фільтрують через паперовий фільтр. Якщо розчин буде каламутним, то фільтрування повторюють через той же фільтр. Фільтрат використовують для аналізу. p align="justify"> б. Виявлення фосфатидилхолін в екстрактах. Метод заснований на нерастворимости фосфатидилхолін в ацетоні, здатності їх утворювати емульсії в воді і давати комплексне з'єднання з хлоридом кадмію, що випадає у вигляді пластівчастого осаду. p align="justify"> Хід визначення. Наливають в суху пробірку 2 мл ацетону і по краплях додають спиртовий фільтрат, отриманий у попередньому досвіді. Спостерігають за помутнінням рідини і випаданням осаду. p align="justify"> У пробірку вносять 20 крапель дистильованої води і поступово доливають 5 крапель спиртового фільтрату мозку. Струшують вміст і спостерігають за утворенням стійкої білої емульсії. p align="justify"> До суміші додають 1 мл спиртового фільтрату мозку і додають 0,5 мл спиртового розчину хлориду кадмію. Відзначають випадання пластівчастого осаду. p align="justify"> в. Виявлення складових компонентів фосфатидилхолін. Метод заснований на гідролізі виділених фосфатидилхолін в розчині гідроксиду натрію і постановці якісних реакцій на складові частини їх молекул: жирні кислоти, гліцерин, холін і фосфорну кислоту. Жирні кислоти виявляють додаванням соляної кислоти до гідролізату, що містить розчинні натрієві солі жирних кислот; в результаті утворюються нерозчинні вільні жирні кислоти, що спливають на поверхню. p align="justify"> Холін при нагріванні перетворюється на тріметіламін, що має запах оселедцевого розсолу нагрівання
- CH2 - N + (CH3) 3? N (CH3) 3 + АЛЕ - CH2 - CH2 - OH
триметиламіну має виражені основними властивостями, тому виявляється по посиніння лакмусового папірця. Акролеїн виявляється по характерному дратівної запаху. Реакція, на якій засновано виявлення фосфорної кислоти, викладена в роботі 11. p align="justify"> Хід визначення.
Гідроліз фосфатидилхолін. Спиртовий екстракт (фільтрат) з тканини мозку упарюють у пробірці на водяній бані і додають 3 мл розчину гідроксиду натрію. Кип'ятять протягом 10 хв.
Відкриття холіну. У ту ж пробірку вносять 20 крапель гідролізату і нагрівають. Утворюється з холіну тріметіламін виявляють по появі запаху оселедцевого розсолу. До отвору пробірки підносять вологу червону лакмусовий папірець і спостерігають зміну її забарвлення.
Відкриття жирних кислот. До залишився гідролізату додають по краплях розчин соляної кислоти до кислої реакції середовища, виявленої по лакмусовим папері. На поверхню рідини спливають у вигляді пластівчасту маси вищі жирні кислоти. Вміст пробірки фільтрують через складчастий паперовий фільтр, на якому затримуються жирні кислоти. Фільтрат нейтралізують (за лакмусовим папірцем), додаючи по краплях розчин гідроксиду натрію, і упарюють на водяній бані насухо. Сухий залишок використовують для реакцій на гліцерин і фосфорну кислоту.
Відкриття гліцерину. Частина сухого залишку переносять у суху пробірку, додають кілька кристалів безводного гідросульфату калію і обережно нагрівають. З'являється характерний запах акролеїну.
Відкриття фосфорної кислоти. Що залишився сухий залишок сплавляють в тиглі з невеликою кількістю (одна очна лопатка або на кінчику скальпеля) порошку нітрату калію і карбонату натрію (сплавлення проводять у витяжній шафі!). Після охолодження тигля до сплаву додають розчин азотної кислоти, суміш зливають в пробірку. До 2 мл реактиву молібдату амонію доливають невеликими порціями випробуваний розчин. Суміш нагрівають до кипіння. При стоянні утворюється жовтий осад фосфомолібдата амонію.
Оформлення роботи. Результати оформити у вигляді таблиці і описати ознаки, за якими виявляється відповідне речовина. br/>
МатеріалІсследуемий компонентРеакція ...
