кож з використанням техніки фазово-контрастної мікроскопії. [5]
Біомоделі для виділення та накопичення вірусу віспи овець
Якщо випробуваний матеріал непридатний для вірусоскопіі, потрібно поставити з ним биопробу на неиммунной молодий вівці. Випробувану суспензію, приготовлену загальноприйнятим методом, інокуліруют внутрішньошкірно в безшерста поверхню хвоста в дозі 0,1 - 0,15 мл. Спостереження ведуть протягом 10 днів. У позитивних випадках на місці ін'єкції матеріалу розвивається місцевий оспенний процес, специфічність якого вдається підтвердити методом вірусоскопіі мазків, приготовлених з зрізаного епітелію розеоли на присутність елементарних тілець. Вірус в віспяних вузликах шкіри накопичується в титрі до 10 6,5 ІД 50/0, 5см 3 .
При використанні для виділення вірусу культурою клітин, суспензію випробуваного пат. матеріалу вводять на моношар клітин в пробірках або пеніцилінових флаконах у дозі 0,1 см 3 . заражені клітини витримують при температурі 37-38С протягом 60 хв, потім інокулят зливають, моношар кілька кратно промивають розчином Хенкса, що містить антибіотики, вносять підтримуючу середу і культивують при температурі 37-38С протягом 10-12 діб. Протягом зазначеного строку щодня проводять мікроскопію моношару з метою виявлення ознак наявності оспенного вірусу. Про присутність вірусу свідчить цитопатогенну дію (ЦПД) яке проявляється в монослое клітин з 4-7 доби після інокуляції суспензії випробуваного пат. матеріалу. ЦПД характеризується округленням клітин, формуванням ними гроздевідних утворень у монослое, в подальшому-розривів між клітинами, що призводять до повної деструкції моношару клітин. ЦПД вірусу віспи овець приблизно однаково проявляється у всіх чутливих культурах клітин і накопичується в них від 10 5,0 до 10 7,5 ТЦД 50/см 3 . При позитивній біопробі і вірусоскопіі необхідність в інших методах лабораторної діагностики відпадає.
Культивування вірусу віспи овець, залежно від його біологічних властивостей і призначення, проводять в організмі овець і чутливої вЂ‹вЂ‹культурі клітин. Патогенні штами вірусу віспи овець культивують в організмі молодих інтактних овець, а модифіковані-в одній з чутливих культур. p align="justify"> Вірулентні штами вірусу віспи овець, призначені для перевірки імуногенності вакцинних препаратів, культивують в організмі вівці. Для цього, вірус вводять вівцям внутрішньошкірно в дозі 0,5 см 3 і спостерігають за розв...
