Реферат на тему:
Авторадіографія.
Введення радіоактивної мітки в біологічні препарати
Авторадіографія
Основне призначення авторадіографії - реєстрація смуг радіоактивно мічених препаратів (білків і НК) після електрофорезу. Для цієї мети використовують медичну "неекрановану" рентгенівську плівку (у плівках з захисним шаром на поверхні поглинається частина випромінювання). Почорніння рентгенівської плівки (після прояву) відбувається як під дією електронів, так і у-випромінювання. Препарати, мічені тритієм, зважаючи на малу проникаючої здатності його (3-електронів, лише у випадку дуже високих інтенсивностей випромінювання вдається реєструвати даним методом. Авторадіографія препаратів, мічених S і С здійснюється цілком успішно. Однак платівки ПААГ в цих випадках необхідно перед реєстрацією радіоактивності повністю висушувати. В іншому випадку Р-електрони, що випускаються в глибині гелю, не досягнуть плівки. Сушать гель, уклавши його на товсту фільтрувальний папір (він прилипає і при сушінні не зіщулюється), 1-2 години у вакуумі і з нагріванням або 36 годин на повітрі при кімнатній температурі - до стану тонкої, міцної і прозорої плівки. Тим не менш, небажано, щоб товщина вологого гелю перевищувала 0,4 мм.
Рентгенівську плівку накладають емульсією прямо на гель. У такій постановці досвіду Р-електрони вуглецю і сірки проникають в шар емульсії на глибину близько 0,25 мм. Для хорошого прилягання плівки до гелю під кришку відповідної касети з пружинними затискачами кладуть прокладку з губчастої гуми. Саму касету загортають у чорний папір. Експозиція триває кілька днів. Потім слід, як звичайно, прояв і фіксація. p> Енергія Р-випромінювання радіоактивного фосфору досить велика, щоб його авторадіографію можна було вести прямо з вологою пластини гелю. Гель, покритий плівкою, залишають на одній зі скляних пластин, загортають у тонкий поліетилен і експонують, як було описано вище, протягом кількох годин - краще на холоді (-20 В°), з тим, щоб перешкодити розпливання смуг в гелі під час експозиції за рахунок дифузії. Р-електрони радіоактивного фосфору можуть проходити в матеріалі рентгенівської плівки до глибини в 6 мм. Це означає, що більша частина їх "прошиває" плівку, що не передавши всю свою енергію молекулам бромистого срібла і, отже, не найкращим чином реєструються. Іноді, якщо інтенсивність Р-випромінювання невелика (за дещицею змісту), ці "Пропадає даремно" електрони вловлюють за допомогою фосфоресцирующего екрану, який встановлюють по інший бік плівки. Потрапили на екран Р-електрони викликають його світіння і плівка реєструє (не без деякого розмиття зображення) ще й світиться смугу на екрані. Зате яскравість почорніння в цьому випадку може збільшитися в 5-8 разів.
Оскільки при використанні флюоресценції екрану можлива релаксація кристалів бромистого срібла, що розпалися під дією світла, експозицію плівки краще проводити в цьому випадку при - 70 В°.
Для правильного суміщення плівки після прояву з вихідним гелем, на ньому до авторадіографії роблять дві позначки по кутах радіоактивними чорнилом.
Сцинтиляційні лічильники випромінювання
Метод авторадіографії має два серйозні недоліки. По-перше, не можна кількісно оцінити інтенсивність радіоактивного випромінювання. Ступінь почорніння смуг для цього критерій дуже грубий. По-друге, практично неможливо в багатьох випадках авторадіографії зареєструвати випромінювання тритію
Обидва ці нестачі знімаються при використанні рідинних сцинтиляційних лічильників. Ідея полягає в тому, щоб розчинити радіоактивно-мічених речовина в рідині, яка на вплив Р-електронів, що володіють навіть відносно малою енергією, відповідала б спалахами світла. Ці спалахи можуть бути зареєстровані високочутливими фотоелементами. Така рідина іменується сцинтилятором , а самі спалаху - Сцинтиляцій. Принцип дії тут простий. Електрон, що вилетів з ядра радіоактивного атома, входить до складу якоїсь біологічної молекули, відразу ж потрапляє в рідку середовище, де він приречений зіткнутися на шляху свого польоту (нехай він буде вимірюватися лише частками міліметра) з молекулами сцітіллятора. Чимала частина таких зіткнень призведе до передачі частини кінетичної енергії електрона якомусь "легко збудливому" зовнішньому електрону сцинтилятора. Швидше за все електрону, що бере участь у реалізації пов'язаних подвійних зв'язків у ароматичної молекулі, наприклад, толуолу або нафталіну. Звичайна "Час життя" такого електрона в збудженому стані - близько 10 ~ 8 сек "після чого він повертається до свого нормального стану, віддаючи отриману "зайву" енергію за допомогою випускання кванта світла.
Електрони летять дуже швидко. Тому інтервали між ...
