Зубарєва Є.В.
Одним з актуальних напрямків сучасної фізіології є вивчення адаптаційних реакцій живих організмів на клітинному рівні [1]. Система крові, як одна з найбільш реактивних систем, активно включається в реакції на різні зовнішні впливи. Особливе значення мають зміни функціонального стану білих клітин крові, що виконують в організмі комплекс важливих функцій: участь у запальних та імунних процесах, створення місцевого мікросудинного опору та органної перфузії [2]. Разом з тим резервні можливості і регуляторні реакції лейкоцитів крові при екстремальних зовнішніх впливах на сьогоднішній день мало вивчені. Мета: Вивчення осморегуляторних реакцій лейкоцитів крові ссавців в умовах інтенсивної м'язової діяльності на фоні дії аліментарного фактора - тривалого (6 міс.) Вживання жорсткої води.
Завдання:
1) Вивчити вплив фізичного стомлення в результаті динамічних навантажень, на реактивність лейкоцитів; 2) Встановити вплив на мембранний резерв, осморегуляторних реакції і осмотичну стійкість лейкоцитів крові ссавців інтенсивної м'язової діяльності на фоні дії аліментарного фактора - тривалого вживання жорсткої води.
Методика.
Досліди проведені на щурах лінії Вістар: I гр.- Контрольна (інтактні тварини); II гр.- Одноразова м'язове навантаження (плавання до повного стомлення); III гр.- Тварини, які вживали воду з підвищеним вмістом кальцію (66,48 мг / л); IV гр.- Плавання до повного стомлення на тлі вживання жорсткої води.
Кров для досліджень брали відразу по закінченні теплового впливу шляхом декапитации після дачі легкого ефірного наркозу. В якості антикоагулянту використовували гепарин (10 од. / Мл). Для отримання суспензії лейкоцитів кров центрифугували 10 хв при 1500 об / хв, збирали лейкоцитарна кільце. Домішка еритроцитів руйнували 0,83% розчином хлориду амонію [4]. Клітини двічі відмивали ізотонічним буферним розчином. Суспензію використовували для вивчення осмотичної стійкості, визначення мембранного резерву та регулювання обсягу. Для цього по 5 мкл суспензії лейкоцитів поміщали в лунки планшеток для мікробіологічних досліджень. До клітин додавали по 50 мкл одного з розчинів хлориду натрію (1я лунка - 0,9%; 2, третій лунки - 0,45%; 4, 5я лунки - 0,2%). З плином часу інкубації (1, 2, 4 лунки - 60 с; 3, 27 травня лунки - 1 год) з клітин готували мазки, фарбували їх АЗУР-еозином. Визначали діаметр клітин за допомогою окуляр-мікрометра. Функціональний стан лейкоцитів оцінювали з кінетики набухання (60 секунд в 0,45% розчині) і здатності відновлювати вихідний обсяг при годинної експозиції в тому ж середовищі. Резервні можливості мембрани визначали щодо змін розміру клітин після 60 секундної інкубації в 0,2% розчині хлориду натрію в порівнянні з вихідною величиною [3].
Таблиця 1.
Примітка: СГ - сильно гіпотонічний розчин NaCl (0,2%), УГ - помірно гіпотонічний розчин NaCl (0,45%), І - ізотонічний розчин NaCl (0,9%).
% - Показує зміну...
