М.Ю. Скоркіна, Е.А. Ліпунова, А.С. Зеленцова
Бєлгородський державний університет, 308015, м. Білгород, вул. Перемоги, 85
Вперше для еритроцитів жаб визначений мембранний резерв, розрахований коефіцієнт резервної поверхні та виявлено впливу на ці найважливіші клітинні характеристики гіпотонії. Вивчено особливості клітинної відповіді на адреналінову, гіпотонічну навантаження і їх поєднання. Показана стабілізуюча роль адреналіну на мембрану, мембранні канали та участь гормону в регуляції форми еритроцита.
Введення
Здатність еритроцитів до регуляції обсягу має важливе значення в реалізації реологічних властивостей крові, забезпеченні оптимального кисневого харчування тканин і видаленні метаболітів. У механізмах підтримки обсягу особлива роль відводиться процесам ауторегуляції і гормонам, здатним модифікувати роботу іонних переносників і змінювати стан цитоскелету [1], макромолекули якого забезпечують клітці високу чутливість до зміни обсягу [6], перешкоджають вільному току води в клітину [5], змінюють пружно-еластичні характеристики мембран, що має значення для контролю транспортної активності.
Метою дослідження було вивчення впливу адреналіну на резервні можливості мембран, регуляторні здібності і стійкість еритроцитів до гіпоосмотіческая навантажень.
Матеріали і методи дослідження
Дослідження in vitro проведені на еритроцитах зимових жаб Rana ridibunda Pall. Тричі відмиті еритроцити інкубували протягом 15 хв при температурі 200C з адреналіном (0,25 ммоль-л - 1), а потім поміщали в гіпоосмотіческая середу (0,2% розчин хлориду натрію). У ході годинної експозиції через кожні 30 з здійснювали відеорегістрація клітин і комп'ютерний аналіз в кожній контрольній точці, використовуючи аналізатор зображень з програмним забезпеченням «Відео - Тест - Майстер - Морфологія». Вимірювали максимальну і мінімальну осі клітини; розраховували середній обсяг, товщину (висоту), площа поверхні і коефіцієнт ексцентричності [3]. Біометричні індекси визначали за запропонованим нами способом [2]. Контролем служили еритроцити, також занурені в 0,2% NaCl, але не інкубовані з адреналіном.
Результати дослідження та їх обговорення
Обробка клітин адреналіном змінює властивості мембрани. Через 30 з експозиції при незначному збільшенні обсягу (на 1,9%; р> 0,05) приріст площі поверхні мембрани склав 57,9% (р <0,001), але через 300 с коефіцієнт ексцентричності, обсяг, товщина і площа поверхні в дослідній пробі клітин були нижче на 3,2; 3,6; 0,3 і 3,3% (р> 0,05) відповідно в порівнянні з контрольною. Через 1 год товщина еритроцитів зменшувалася на 6,1% (р <0,001) і збільшувалися коефіцієнт ексцентричності, обсяг і площа поверхні мембрани відповідно на 5,6% (p <0,05); 5,1 і 6,2% (р> 0,05) (табл.).
Динаміка морфометричних характеристик еритроцитарної популяції жаб
Час,
з
Умови
s
V
T
S
30
контроль
0,774 +0,008
