рухомої фази - вологого гексану або гептана, поступово В«забруднюючихВ» безводний силікагель водою. Регенерацію вийшла з ладу колонки (на відміну від ремонту колонки) проводять без зняття кінцевих фітингів. Вибирають комплекс розчинників і хімікатів, який дозволяє видалити небажані забруднення з сорбенту і фільтрів хімічним або фізико-хімічним впливом. Регенерація успішна тільки в тому випадку, якщо в процесі експлуатації колонки не сталося фізичної або хімічної деградації шару сорбенту, тобто утворення каналів, порожнеч або відщеплення прищепленої фази. Перше питання, що виникає при регенерації, - це чи можна для прискорення та покращення процесу змінити напрямок потоку через колонку, щоб забруднення з сорбенту і фільтра на вході відразу віддалялися, не проходячи через весь шар сорбенту. Питання не пусте, так як деякі досвідчені фахівці вважають це можливим, а інші рішуче заперечують, вказуючи на можливість порушення щільності упаковки, утворення каналів і т.д. Фірми-виробники теж не одностайні: деякі вважають зміну напрямку потоку через колонку небезпечним; інші, навпаки, рекламують свої колонки як здатні працювати при будь-якому-напрямку потоку; треті навіть не вказують для своїх колонок напрямку потоку, вважаючи, що це байдуже.
Шар сорбенту в колонці, на нашу думку, не остаточно сформований і однорідний після упаковки колонки. Якщо після упаковки і зняття тиску верхній шар сорбенту в колонці вирівнюється і закривається фітінгом при атмосферному тиску, то нижній шар (з боку детектора) продовжує залишатися під тиском через тертя шару сорбенту про стінки колонки; якщо зняти нижній фітінг, це тиск видавлює сорбент з колонки (навіть жорсткий на основі силікагелю, не кажучи вже про напівжорстких на полімерній основі) досить помітно, у разі силікагелю на 1-1,5 мм. Тому зміна напрямку потоку при регенерації колонки недоцільно В»особливо при підвищених швидкостях потоку і високому тиску. Якщо це все ж здійснюється, слід зменшити витрату розчинника і знизити тиск так, щоб вони не перевищували 1/2 або 1/3 від значень робочих параметрів.
Якими розчинниками і в якій послідовності вести регенерацію колонок-це залежить від типу сорбенту і від передбачуваних забруднень, які слід видалити. Мається багато рекомендацій, які розчинники, в якій послідовності і для яких сорбентів використовувати, проте ніхто краще хроматографіста не знає, які забруднення він В«посадивВ» на колонку і який розчинник придатний для їх видалення. Якщо забрудненнями є солі, то для їх видалення найкраще вода, якщо полімери - хлороформ або тетрагідрофуран, якщо вода - безводні спирти, хлоруглеводородов і т.д. Для трудноудаляємиє забруднень, особливо біологічних, використовують диметилформамід, диметилсульфоксид, сильні буферні розчини. Не слід забувати про принцип повної смешиваемости подальшого і даного розчинників, інакше можливе освіта гетерофазних систем. Для регенерації сілікагелевой колонок рекомендується використовувати наступний ряд розчинників: тет...
