електричну. Якщо вимірювання ведеться без виділення вузького діапазону довжин хвиль, тобто вимірюються характеристики усього світлового потоку, то такий метод аналізу часто називається колориметричним. Якщо ж виділяється характерний для поглинання даною речовиною оптичний діапазон і вимір проводиться на певній довжині хвилі, тоді говорять про власне фотометрическом методі аналізу. Фотометричний метод є більш об'єктивним методом, ніж колориметричний, оскільки результати його менше залежать від поглинання світла іншими (интерферирующими) пофарбованими речовинами [16].
Фотометричний аналіз - один з найстаріших і поширених фізико-хімічних методів, для нього потрібно відносно просте устаткування, в той же час він характеризується високою чутливістю і можливістю визначення великої кількості органічних речовин. Відкриття все нових і нових реагентів, що утворюють забарвлені сполуки з неорганічними іонами і органічними речовинами, розробка принципів сполучених реакцій робить в даний час застосування цього методу майже необмеженим.
Фотометричний метод аналізу може застосовуватися для великого діапазону визначаються концентрацій. Його використовують як для визначення основних компонентів різних складних речовин, так і для визначення мікродомішок в об'єктах.
Комбінування з деякими методами розділення і збагачення - хроматографическим, екстракційним - дозволяє на кілька порядків підвищити чутливість фотометричних методів.
Фотометричні властивості розчиненої речовини характеризуються коефіцієнтом пропускання T (?), коефіцієнтом відбиття R (?), і коефіцієнтом поглинання A (?), які для одного і того ж речовини пов'язані співвідношенням (1):
T + R + A=1 (1)
Визначення безрозмірних величин T, R і A виконується за допомогою фотометров (приладів для вимірювання якої-небудь фотометричної величини) шляхом реєстрації реакцій приймача оптичного випромінювання на відповідні потоки випромінювання. При цьому в рутинній лабораторній практиці прийнято позначати прилади, реєструючі поглинання світла речовиною, фотометрами, відображення - відбивними фотометрами.
Фотометричні методи застосовуються також у тих випадках, коли вивчається здатність речовин розсіювати (нефелометрія) і пропускати випромінювання (турбідіметрія), переизлучать поглинене випромінювання (флуориметр), змінювати ступінь поляризації випромінювання при проходженні його через оптично активні речовини ( поляриметрия).
Крім того, одним з важливих розділів фізичної оптики є рефрактометрия, що вивчає показники заломлення оптичного випромінювання твердих, рідких і газоподібних речовин в залежності від довжини хвилі випромінювання. Названі оптичні методи застосовуються для вивчення стану біологічних систем та їх зміни в процесах асоціації-дисоціації, взаємодії з іншими молекулами, утворення і розпаду комплексів фермент-субстрат, антиген-антитіло, білок-ліпід, білок - нуклеїнова кислота; фотофізичних і фотохімічних процесів і т.д.
Висока чутливістю, точність, швидкодія і зручність використання для рутинних досліджень зумовлюють широке застосування оптичних методів в клінічній лабораторній діагностиці [1, с. 7-8].
. 2 Класифікація методів фотометричного аналізу
Метод аналізу, заснований на переведенні визначається компонента в поглинає світло з'єднання з наступним визначенням кількості цього компонента шляхом вимірювання світлопоглинання розчину отриманого з'єднання, називається фотометричним.
За забарвленням розчинів забарвлених речовин можна визначати концентрацію того чи іншого компонента або візуально, або за допомогою фотоелементів - приладів, що перетворюють світлову енергію в електричну. Відповідно до цього розрізняють фотометричний візуальний метод аналізу, званий часто колориметричним, і метод аналізу із застосуванням фотоелементів - власне фотометричний метод аналізу. Фотометричний метод є об'єктивним методом, оскільки результати його не залежить від здібностей спостерігача, на відміну від результатів колориметрического - суб'єктивного методу.
Фотометричний метод аналізу може застосовуватися для великого діапазону визначаються концентрацій. Його використовують як для визначення основних компонентів різних складних технічних об'єктів з вмістом до 20-30% визначається компонента, так і для визначення мікродомішок в цих об'єктах при утриманні їх до 10 - 3 - 10 - 4%. Комбінування фотометричних методів з деякими методами поділу - хромотографіческім, екстракційним дозволяє на 1-2 порядки підвищити чутливість визначення, довівши його до 10 - 5.
У деяких випадках фотометричний метод може бути застосований для одночасного визначення в розчині в розчині декількох іонів, хоча йо...
