й технологічний підйом, що дозволяє застосовувати її для білків, пептидів, вуглеводів, ДНК, ліків і багатьох інших біологічно активних молекул. Завдяки таким способам іонізації, як іонізація електроспрея (ESI) або лазерна десорбція/іонізація з матриці (MALDI), мас-спектрометрія стала незамінним інструментом для біохімічних досліджень. В
Основи мас-спектрометрії
Мас-спектрометр визначає масу молекули, вимірюючи відношення маси до заряду ( m / z ) її іона. Іони генеруються при втрати або отриманні заряду нейтральними частинками. Після утворення іони електростатично направляються в аналізатор маси, де вони розділяються відповідно своєму m / z і, нарешті, детектуються. Результатом іонізації молекул, поділу іонів і детектування іонів є спектр, за яким можна визначити молекулярну масу і навіть деяку інформацію про будову речовини. Можна провести аналогію між мас-спектрометром і призмою, як показано на рис. 1.1 . У призмі світло розділяється на компоненти по довжинах хвиль, які потім визначаються оптичним рецептором. Точно так само, в мас-спектрометрі згенеровані іони розділяються в аналізаторі маси, підраховуються і визначаються в детекторі іонів (таких, як, наприклад, електронний помножувач).
В
Принципове пристрій мас-спектрометра
Чотири базових компонента є стандартними для більшої частини мас-спектрометрів ( рис. 1.2 ): система введення зразка, пристрій іонізації
В
br/>
ції, аналізатор маси і детектор іонів. Деякі прилади комбінують введення зразка і іонізацію, в інших об'єднані аналізатор маси і детектор. Проте всі молекули зразка зазнають однакові впливи незалежно від конфігурації приладу. Молекули зразка вводяться через систему впускання. Потрапивши всередину приладу, молекули перетворюються в іони у пристрої іонізації, а потім електростатично переносяться в аналізатор маси. Іони потім розділяються відповідно їх m / z . Детектор перетворює енергію іонів в електричні сигнали, які потім надходять в комп'ютер.
В
Способи введення зразка
Введення зразка був однією з перших проблем в мас-спектрометрії. Для проведення аналізу мас зразка, який спочатку знаходиться при атмосферному тиску (760 Торр), він повинен бути введений в прилад таким чином, щоб вакуум всередині останнього залишився практично незмінним (~ 10 -6 Торр). Основними методами введення зразка є пряме введення
зонда або підкладки, зазвичай використовуване в MALDI-MS, або пряме вливання або впорскування в пристрій іонізації, як у методі ESI-MS. [1]
Пряме введення : використання прямого введення зонда/підкладки ( рис. 1.3 ) - дуже простий спосіб доставки зразка в прилад. Зразок спочатку розміщується на зонді, а потім вводиться в іонізаційну зону мас-спектрометра, зазвичай через вакуумний клапан. Зразок пі...
