. Загальна характеристика методу ВЕРХ
.1 Високоефективна рідинна хроматографія
Високоефективна рідинна хроматографія або рідинна хроматографія високого тиску є одним з варіантів колонкової рідинної хроматографії [4]. Високоефективна рідинна хроматографія - метод розділення з використанням твердої нерухомої фази і рідкої рухомої фази. Поділ досягається за рахунок розподілу, адсорбції або іонообмінного процесу, залежно від використовуваного типу рухомої фази. Високоефективна рідинна хроматографія має певні переваги перед газовою хроматографією. Аналізовані сполуки розчиняються у відповідному розчиннику, і більшість розділень відбувається при кімнатній температурі. Таким чином, більшість нелетких або термічно нестабільних сполук, можуть хроматографіроваться без розкладання або без необхідності отримання летючих похідних [26].
.2 Склад рідинного хроматографа
Рис.1 Блок-схема рідинного хроматографа: 1 - резервуар для рухомої фази; 2 - насос; 3 - інжектор; 4 - колонка; 5 - термостат; 6 - детектор; 7 - реєструюча система.
Рідинний хроматограф складається з резервуара, містить рухливу фазу, насоса для пропускання рухомої фази через систему під високим тиском, інжектора для введення зразка в рухому фазу, хроматографічні колонки, детектора і пристрої для збору даних (наприклад, комп'ютера , інтегратора або самописця). Крім того додатково можуть використовувати комп'ютери для контролю хроматографических налаштувань і операцій, забезпечуючи тим самим тривалі періоди автоматичної роботи [6].
.3 Насосні системи і інжектори
антибіотик рідинна хроматографія рулид
Насосні системи високоефективної рідинної хроматографії використовують для дозованої подачі рухомої фази з резервуарів з розчинником в колонку через трубки і з'єднання з високим тиском. Робоче тиску складають зазвичай до 1500 psi (350 кг / вище, швидкість до 10 мл / хв. Насоси, використовувані для кількісного аналізу, повинні бути виготовлені з матеріалів, стійких до компонентів рухомої фази, і мати здатність подачі рухомої фази з постійною швидкістю і мінімальним відхиленнями протягом тривалого періоду часу.
Після розчинення в рухомій фазі хроматографіруемого з'єднання вводять в рухому фазу, вручну шприцом або петльовим дозатором, або автоматично за допомогою автодозатор. Автодозатор складається з штатива для приміщення зразків, верхні частини яких мають проколювали прокладку або пробку і пристрої введення для перенесення зразка з флаконів в петлю, звідки зразок завантажується в хроматограф. Для деяких автодозатор можна програмувати контроль об'єму зразка, число введень і циклів промивання петлі, інтервал між введеннями та інші робочі параметри.
Шприц може використовуватися для введення зразків вручну через прокладку, якщо тиск на вході колонки менше 70 атм (близько 1000 psi). При більш високих тисках необхідний занурити пробовідбиральний клапан. Деякі клапанні системи включають калібровану петлю, яку заповнюють випробовуваним розчином для перенесення на колонку в рухомій фазі. В інших системах, випробуваний розчин переноситься шприцом в порожнину, а потім перенаправляється в рухому фазу [26].
.4 Хроматографічні колонки
