рименти проводяться для білкових гідролізатів, даючи інформацію одночасно по MS і MS/MS. Ця інформація дозволяє ідентифікувати білки і характеризувати пост-трансляційну модифікацію. Діапазон мас (~ 4000 m / z ) комерційних LC-пасток добре відповідає значенням m / z , генерируемим іонізацією електроспрея пептидів, а дозвіл дозволяє ідентифікувати зарядний стан багатозарядних іонів пептидів. Мас-спектрометри квадрупольної іонної пастки можуть аналізувати пептиди з тріпсінового гідролізату при їх змісті порядку 20-100 фмоль. Іншим цінним якістю техніки іонної пастки для аналізу пептидів є її здатність проводити кілька стадій мас-спектрометрії, які значно збільшують кількість структурної інформації.
[13]
В
Лінійна іонна пастка
В
Лінійна іонна пастка відрізняється від тривимірної (рис. 2.6) тим, що вона замикає іони вздовж осі квадрупольного аналізатора мас, використовуючи двовимірне (2D) радіочастотне (RF) поле з потенціалами, доданими до кінцевим електродів. Основна перевага лінійної пастки перед 3D - більший обсяг аналізатора, який сам по собі значно збільшує динамічний діапазон і покращує діапазон кількісного аналізу.
Обмеження іонної пастки: сканування іона-попередника, В«Правило однієї третиниВ» і динамічний діапазон.
Головними обмеженнями даних можливостей іонної пастки, які утримують її від того, щоб бути досконалим засобом для фармакокінетики та протеоміки, є наступні: 1) здатність давати високу чутливість одночасно для потрійного квадрупольного сканування іона-попередника, і для експериментів зі середнім загасанням неможлива для іонних пасток. 2) Верхня межа співвідношення між m/z попередника і найдрібнішого спійманого фрагмента складає приблизно 0.3 (також відомо як "правило однієї третиниВ»). Ілюстрацією правила однієї третини є те, що фрагментарні іони від m/z 900 НЕ будуть детектуватиметься при m/z менше 300, накладаючи значні обмеження на чергове секвенування пептидів. 3) Динамічний діапазон іонних пасток обмежений тим, що при дуже великому числі іонів всередині пастки просторові вплив зарядів обмежить показність аналізатора. Щоб обійти це, автоматичні сканери швидко перераховують іони перед тим, як ті потраплять до пастку, тим самим обмежуючи число увійшли іонів. Але такий підхід становить проблему, якщо потрібний іон супроводжується великою фоном інших іонів.
В
Двуфокусірующій магнітний сектор
Перші аналізатори мас поділяли іони за допомогою магнітного поля. У магнітом аналізі іони прискорюються в магнітному полі за допомогою електричного. Заряджені частинки, рухомі в магнітно поле, будуть рухатися по дузі, радіус якої залежить від швидкості іон, сили магнітного поля і m / z іона. Мас-спектр виходить скануванням магнітного поля і спостереженням того, як іони потрапляють фіксований точковий детектор. Обмеженням магнітних аналізаторів є відносно малий дозвіл. ...
