аллельной (по Вотсону - Крику), так і в паралельній (за Хугстіну) орієнтації, більш стабільні комплекси утворюються при антипараллельной орієнтації PNA. Дослідження показали малу токсичність PNA [20].
морфоліно (див. рис. 3, VIII) - це реагенти, що суміщають стабільність, резистентність до дії нуклеаз, ефективність, активність протягом довгого періоду, водорастворимость, високу специфічність і низьку токсичність. Молекули мають нейтральний заряд [12,21]. Виробництвом морфоліно займається компанія Gene Tools, LLC (<# "justify"> МодіфікаціяСтаб. До нуклеазамСродство до мішеніАктівація РНКази HНетоксічностьODN-+ + + S-ODN + В± +-Me-ODN + + - В± BH 3 -ODN + + + +2 -O-Me-ON + + + - В± LNA + + + - + PNA + + + - + Morpholino + + + - +
1.2.4 Модифікації азотистих основ
Ефективного антисмислового дії буває важко досягти тільки за рахунок модифікацій сахарофосфатнимі остова. Модифіковані азотисті основи підвищують ефективність дії антисмислових ODN за рахунок збільшення спорідненості до РНК-мішені (аміноаденозін, G-clamp) і швидкості проникнення через плазматичну мембрану (катіонні і цвіттер-іонні групи). p align="justify"> При приєднанні феноксазіна до залишку цитозину виходить так званий G-clamp (див. рис. 6, X), який утворює додаткову водневий зв'язок із залишком гуаніну, завдяки чому на 6 - 18 В° С збільшується температура плавлення гібрида ODN - РНК. Така модифікація виробляється зазвичай по 3 -кінця, що чи не порушує РНКаза H-компетентність [3,22].
При введенні аміногрупи в залишок аденіну (див. рис. 6, XI) також зростає спорідненість до мішені за рахунок утворення додаткової водневого зв'язку із залишком тиміну [23].
В
Рис.
В
Рис. 6. Додаткові водневі зв'язки між С і G clamp (X), між T і A NH2 (XI)
ODN з приєднаними до залишків азотистих основ катіонними і цвіттер-іонними групами (наприклад, спермідіновой, рис. 7) за рахунок свого позитивного заряду не тільки володіють б ? льшим спорідненістю до мішені, але і поліпшеною здатності до проникнення в клітину і стабільністю до дії нуклеаз [3].
В
Рис. 7. Спермідіновое похідне азотистого підстави як приклад катіонної модифікації. br/>
З кінцевими азотистими підставами для візуалізації місця розташування ODN в клітці кон'югують великі флуоресцирующие ліганди, такі як флуоресцеїн [7].
В
Рис.8. Приєднання залишку флюоресцеина до тимін. p align="justify"> 1.2.5 Приєднання об'ємних заступників
Здатність проникати всередину клітини, минаючи к...
