Міністерство освіти и науки України
Дніпропетровський національний університет ім О. Гончара
Хімічний факультет
Кафедра аналітичної хімії
РЕФЕРАТ
з тими
«Використання аналітичних органічніх реагентів у розподільній рідінній хроматографії»
Виконала: студентка гр. ХФ - 09-3м
Кулик Г. С.
Дніпропетровськ 2009
1. Рідінна хроматографія
Цей вид хроматографії БУВ Першів серйозно вивченості хроматографічнім аналітічнім методом, призначеня для віділення природніх з єднань, таких, як рослинні пігменти з розчінів. У старому варіанті РХ виявляла собою Склянов колонку розміром, як правило, 1 на 30 см заповнювалі гранульований твердимо матеріалом и пропускали через неї елюєнт - рідіну-носій, что містіть пробу. Основна незручність такого методу поділу - его мала ШВИДКІСТЬ. Для Досягнення якісного поділу колонку заповнювалі зернами малого розміру, то під дією только сили тяжіння ШВИДКІСТЬ елюювання (проходження елюєнта через колонку) могла знізітіся до декількох крапель у ХВИЛИН. Очевидність способ Збільшення пропускної здатності колонки складається у вікорістанні нагнітального насоса або тиску газу. Основна перевага рідінної хроматографії перед газовою - можлівість Здійснювати поділ при більш низьких температурах, Інтервал якіх обмежується лишь точками кіпіння ї замерзання Розчинник. Це означає, что рідінна хроматографія дозволяє розділяті термічно нестійкі з єднання, например Білки, Які нельзя віпаруваті без руйнування.
У якості одного Із примеров! застосування сучасної РХ розглянемо поділ нуклеозидів. До 1967 р. чіткій поділ уридину, гуанозіна, аденозину ї цитидину на колонці діаметром 6 мм при тиску від 10 до (10-20) 108 кпа чає 1 годину. Два роки тому для аналогічного поділу на колонку діаметром 1 мм при тиску 400-108 кпа Було нужно Всього 24 хв, а в 1970 р. для такого ж поділу у такій же колонці при тиску 5000 108 кпа й достатньо 1,25 хв. На рис. 1 наведена технологічна схема багатоцільового рідінного хроматографа.
Рис. 1. Технологічна схема типового рідінного хроматографа Із прістосуванням для градієнтного елюювання
Два резервуари з Розчинник, А і Б, дозволяють одержуваті суміші розчінніків, Які Використовують в якості рухлівої рідкої фази. Кожний резервуар пов'язаний з камерою знегажування, де путем нагрівання з розчінніків відаляють розчінене Повітря, что у противному випадка может віклікаті з'явиться пухірців у колонці. Спеціальний кран дозволяє подаваті на стовпчики одна з розчінніків або їх суміш у будь-Якій пропорції. Краном ЦІМ можна управляти так, щоб співвідношення обсягів розчінніків мінялося поступово по ходу хроматографічного поділу. Ця методика відома за Назв градієнтного елюювання.
Із крана-змішувача рідина під високого Масова Надходить у хроматограф, поміщеній у термостаті. Спочатку рідина проходити через змійовік, де вона пріймає робоча температура, а потім через предколонку з такою ж насадкою, что ї у ОСНОВНОЇ колонки. Використання предколонкі гарантує Досягнення рівновагі между рухлівою фазою ї насадкою аналітичної колонки. Вона такоже Виконує роль фільтра, что відаляє будь-які домішки, что залиша.
Елюент Із колонки проходити через вімірювальну комірку діференціального детектора до колектора фракцій або зливу. Потік елюента, что проходити через порівняльну комірку детектора, відокремлюють від основного потоку елюенту до побаченим в него проби. У більш простих и більш дешевих системах контроль температурі не передбачення, и відповідно відсутній змійовік, показань на схемі. Іноді НЕ вікорістається ї предколонка, и не всегда Виявлення здійснюється діференціальнім детектором.
Насоси. Високого Масова, необхідне для продвижения рухлівої фази по колонці з достаточно швідкістю, можна здобудуть помощью керованого мотором насоса або помощью стисненого Повітря або азоту, что Надходить Із балона. У последнего випадка потрібна мембрана або поршень для Запобігання прямого контакту газу з рідіною, того что в осоружному випадка Величезна Кількість газу могло б розчінітіся ї віклікаті з'явиться пухерців у колонці або детекторі.
Частіше застосовують поршневі або Одноходовий насос, тобто Фактично шприц Великої ємності, керованих мотором. Більшість детекторів, застосовуваного у РХ, чутліві до Зміни параметрів потоку, тому насос винен нагнітаті рідіну з постійною швідкістю без пульсацій. Для виконан цієї вимоги застосовуються Різні дотепні методи. Один ...
