Введення
гістологічний зріз контроль
У людському тілі існують багато різних за формою і типом клітин. Їх завжди можна відрізнити, особливо здорові від хворих, цим і займається гістологія. Фахівці патологічної гістології досліджують підозрілі клітини тканини. Вони розглядають, аналізують і оцінюють клітини тканини за допомогою звичайного і електронного мікроскопа. Вже через кілька годин гістолог може сказати, здорові чи ні клітини тканини.
Мета: Розглянути особливості приготування гістологічного зрізу і контроль якості його виготовлення
Завдання:
1. Вивчити спеціальну літературу по виготовленню гістологічних зрізів;
. Вивчення етапів приготування гістологічних зрізів;
. Проведення контролю якості гістологічних зрізів.
Об'єкт дослідження : гістологічні препарати.
Предмет дослідження: контроль якості приготованого препарату.
1. Техніка виготовлення гістологічних препаратів
Гістологія, як будь-яка наука, має свої об'єкти і методи їх вивчення. Безпосередніми об'єктами вивчення є клітини фрагменти тканин і органів, особливим способом приготовані для вивчення їх під мікроскопом.
1.1 Фіксація матеріалу
Це перший і дуже відповідальний етап в гістологічної техніці, покликаний зберегти тканини і органи в стані, близькому до того, в якому вони перебували до моменту смерті. У тканинах при фіксації відбуваються складні фізико-хімічні зміни, зокрема коагуляція (осадження) білків. Фіксаторів, які б повністю зберігали структуру, немає. Вони суттєво ущільнюють тканини, зменшують їх обсяг, призводять до незворотних змін. Фіксатор різною мірою зберігає різні структури. Якщо при фіксації речовина руйнується, то нефіксований матеріал заморожують і висушують на холоді (лиофилизация). При цьому не відбувається денатурації білків, зниження активності ферментів, але змінюється форма клітин. Аби не сталося утворення кристалів, виробляють швидку заморозку при температурі від 30 до 60 ° С. Висушування прискорюється в умовах вакууму (в спеціальних апаратах). Заливку матеріалу в середовища проводять швидко, щоб уникнути зволоження
Мета фіксації - вбити клітину, припинити відбуваються в ній (насамперед ферментативні) і, по можливості, зберегти її прижиттєве будову.
Існує ряд загальних правил фіксації: 1) обсяг фіксує рідини повинен не менш ніж в 20 разів перевищувати обсяг фіксованої шматочка тканини; 2) фіксатор повинен мати доступ до зафіксованому матеріалу з усіх боків, з цього на дно посудини кладуть вату або шматочок фільтрувального паперу або підвішують шматочок на нитці; 3) тривалість фіксації залежить від властивостей фіксатора, насамперед від швидкості проникнення фіксатора в тканину; 4) різні фіксатори зберігають різні структурні і хімічні компоненти клітини.
Більшість фіксаторів надає уплотняющее дію на оброблюваний матеріал. Розмір досліджуваних шматочків повинен бути таким, щоб відбулося повне його просочування в оптимальні для даного фіксатора терміни. В середньому для більшості фіксаторів беруть шматочки товщиною 5-10 мм.
Розрізняють фіксуючі засоби (прості фіксатори) і фіксуючі суміші (складні фіксатори):
Прості фіксуючі речовини
1. Формалін
Формалін (формол) найбільш поширена і універсальна рідина з характерним різким запахом. Звичайний продажний формалін являє собою 40% водний розчин формальдегіду.
Формалін - хороше фіксуючий засіб і незамінний у повсякденній роботі патологоанатомічних відділень. Його застосовують не тільки для простої гістологічної роботи (маються на увазі загальні фарби), але і при багатьох спеціальних методах дослідження.
Завдяки своїй універсальній фіксації у формаліні може проводитися паралельна фіксація (маючи на увазі спеціальні завдання, застосування одночасно з формаліном інших фіксуючих рідин).
Формалін добре проникає в тканини і тому може застосовуватися для фіксації досить великих об'єктів. Шматочки органів товщиною 0,5-1 см. Фіксуються в 10% розчині формаліну протягом 24-48 годин. Критерієм достатньої фіксації служить рівномірне ущільнення об'єкта і однаковий вигляд його як з поверхні, так і на контрольному розрізі. У шматочках, які не повністю зафіксованих на контрольних розрізах можна бачити червоні або рожеві фокуси. Деякі тканини після форма...
