МіліхромВ», в якому з допомогою дзеркала, що повертається за заданою програмою на певний кут з заданою частотою, кювети з зразком і порівняльна кювета висвітлюються послідовно монохроматичними променями з вибраними оператором різними довжинами хвиль. Отримана при цьому хроматограмма, що представляє собою комбінацію з двох, трьох або більше хроматограмм, знятих при різних довжинах хвиль, дозволяє отримати якісну інформацію про можливі домішках, замаскованих в одному піку, про природу і структуру речовини, про довжину хвилі, при якій поглинання даної речовини максимально і можна визначити його мінімальна кількість. Ця інформація часто дозволяє по одній хроматограмме вирішити відразу кілька досить складних завдань: виявити домішки, встановити чистоту речовин, визначити довжину хвилі, при якій поглинання кожного речовини найбільшу, провести ідентифікацію. Працювати з таким детектором, звичайно, складніше, ніж з простим спектрофотометром. Існують ще більш ускладнені спектрофотометри, наприклад такі, які дозволяють, відповідно із записаною програмою, змінювати довжину хвилі для кожного піку або групи піків таким чином, щоб отримати максимальну чутливість. Довжина хвилі при цьому змінюється автоматично кілька разів за час аналізу. На закінчення хотілося б підкреслити два положення. Застосуванню спектрофотометрів як універсальних детекторів, що працюють при довжинах хвиль близько 200 нм, у великій мірою перешкоджає дуже малий вибір розчинників, УФ-прозорих в цьому діапазоні. Тільки ретельно очищені ацетонітрил і вода можуть використовуватися в обернено-фазному варіанті при 200 нм і нижче. Отримати такі високочисті розчинники дуже важко, і коштують вони дорого. Ще важче очистити для роботи в цій області алкани (гексан, гептан та ін.)
1.4.3 Рефрактометричні детектори
Диференціальний рефрактометр безперервно реєструє зміна показника заломлення елюата на виході з колонки. Головною перевагою цього детектора є універсальність, так як при виборі відповідного розчинника він може детектувати будь-які речовини. Тому він займає друге місце (після УФ-детектора) за частотою використання. До інших достоїнств рефрактометра відносяться можливість роботи з будь-якими розчинниками в широкому інтервалі швидкості потоку, невисокі вимоги до чистоті рухомої фази, надійність і зручність в експлуатації. Деякі моделі детекторів можуть працювати при температурі до 150 В° С, що є виключно важливим для ексклюзіонной хроматографії ряду синтетичних полімерів.
Рефрактометр являє собою Недеструктивні концентраційний детектор середньої чутливості. Остання визначається різницею показників заломлення елюенту і аналізованих речовин і часто може бути підвищена за рахунок правильного вибору рухомої фази. У оптимальних умовах межа виявлення для рефрактометра досягає 5 • 10 -7 г/мл. Основні недоліки рефрактометричних детекторів-практична неможливість використання при градієнтному елюювання і необхідність ретельної стабілізації температури. Для роботи на максимальній чутливості потрібно підтримувати температуру елюенту і обох осередків кювети. з точністю до 10 -3 -10 -4 В° С, що важко навіть при приміщенні кювети в металевий блок з великою теплоємність і використанні ефективних теплообмінників. Останні, у свою чергу, збільшують мертвий обсяг між колонкою і кюветою детектора, що призводить до додаткового розмивання хроматографічних зон і зниження ефективності поділу.
Рефрактометри вельми чутливі до пульсації потоку, тому при роботі з цими детекторами необхідно застосовувати демпфирующие пристрою.
Промисловість виробляє Рефрактометричні детектори трьох типів, що розрізняються принципами вимірювання.
Рефрактометр оптичного відхилення - найбільш поширений тип даного приладу. Принцип дії детектора заснований на тому, що при проходженні променя світла через кювету, заповнену двома рідинами з різними показниками заломлення, промінь відхиляється на кут, пропорційний різниці цих показників заломлення.
Принципова схема рефрактометра показана на рис. 8.12. Світло від лампи 1 проходить через маску 2, збирається в паралельний пучок лінзою 3 і потрапляє в кювету. Кювету являє собою два осередки у вигляді призм із загальною гранню; в вимірювальну клітинку 4 надходить елюент з колонки, а порівняльна комірка 5 заповнена чистим розчинником. При зміні показника заломлення в вимірювальної комірки промінь світла відхиляється від первинного напряму, відбивається дзеркалом 6 назад в кювету, знову відхиляється і через лінзу 3 фокусується на фотосопротівленіе 7. Останнє виробляє електричний сигнал, пропорційний положенню променя світла, який посилюється електронним підсилювачем 8. Спеціальна скляна пластина 9 служить для встановлення оптичного нуля.
Рефрактометр оптичного відхилення може працювати з будь-якими розчинниками і має широкий діапазон лінійності. Місткість кювети зазвичай дорівнює 10 мкл, а поріг чутливості становить 5 • ...
