10 -8 -2 • 10 -7 од. рефракції. До цього типу належать широко відомий рефрактометр R401 фірми В«УотерсВ» і унікальний лазерний рефрактометр ЛР-1 [24] з місткістю кювети всього 0,1 мкл.
Рис. 1.13. Схема рефрактометра Френеля: 1 - призма, 2 - дзеркальна сталева пластина, 3 - проектор, 4 - кювети; 5 - фокусують лінзи; 6 - здвоєне фотосопротівленіе
В
Рефрактометр Френеля. Дія даного детектора засноване на законі Френеля, який свідчить, що кількість світла, відбитого від поверхні розділу двох речовин (рідини і скла), пропорційно різниці показників заломлення цих речовин та кутом падіння світла на поверхню розділу. Для отримання максимальної чутливості кут відображення повинен бути близький до критичного. Основою конструкції рефрактометра Френеля (рис. 8.13) є скляна призма 7 з кутом при вершині 90 В°, основа якої є верхньою стінкою кювет. Вимірювальна та порівняльна щілиновидні кювети утворені отворами спеціальної форми у тонкій прокладці з фторопласту, затиснутою між підставою призми 1 і дзеркальної пластиною з нержавіючої сталі 2 (нижня стінка кювет), яка одночасно є теплообмінником. Проектор 3 виробляє два паралельних пучка світла, які сфокусовані на поверхні розділу скла і рідини в робочій і порівняльної кюветах 4. Світловий потік в кюветах проходить через тонкий шар рідини і відбивається від пластини 2. Відбите світло фокусується лінзами 5 на вимірювальне та порівняльне фотосопротівленія 6. Різницевий сигнал посилюється електронним підсилювачем. Проектор 3 змонтований на окремої оптичній лаві, яку можна повертати для зміни кута падіння і підтримки кута відбиття, близьким до критичного. Головним гідністю рефрактометра Френеля є мала місткість кювети - 3-5 мкл, що дозволяє прийняти його в поєднанні з сучасними високоефективними колонками. Основні недоліки - необхідність використання двох призм (1,31-1,44 і 1,40-1,55) для перекривання усього необхідного діапазону показників заломлення розчинників і дуже високі вимоги до чистоти кювет. Цей детектор найбільш чутливий до пульсацій потоку і має менший діапазон лінійності, ніж рефрактометр оптичного відхилення, а поріг чутливості-~ 10 -7 од. рефракції.
Основним виробником рефрактометрів Френеля є фірма В«LDCВ» (детектори типу В«РефрактомоніторВ»). Інтерферометричний рефрактометр відносно недавно розроблений фірмою В«ОптілабВ» (Швеція) і випускається тільки розробником. Він являє собою інтерферометр c двома проточна кюветами, який вимірює різницю показників Заломлення в одиницях довжини світлової хвилі. За даними фірми, у цього детектора дуже висока лінійність сигналу, а чутливість на порядок вище, ніж у інших дефрактометров. Однак невеликий досвід роботи з цим детектором показує, що для отримання стабільної нульової лінії потрібно дуже ретельне термостатування всій хроматографічної системи, і повністю реалізувати його високу чутливість практично не вдається.
1.4.4 Флуоріметріческой детектори
Детектування по флуоресценції застосовують в біології, медицині, форма-кологіі, при аналізі харчових продуктів і контролі забруднення навколишнього середовища. Флуоресцентними властивостями, тобто здатністю випромінювати світло (у видимій області спектра) під дією ультрафіолетового випромінювання, володіють багато біологічно-активні речовини: ліки, вітаміни, стероїди. Барвники, з'єднання з сполученими зв'язками, в тому числі поліядерні ароматичні вуглеводні, також можна визначати з допомогою флуоріметріческого удетектора, при цьому чутливість визначення велика.
Інтенсивність флуоресцентного випромінювання залежить від інтенсивності збуджуючого випромінювання та квантового виходу процесу збудження. Тому для підвищення чутливості методу слід використовувати досить потужні джерела світла, наприклад газорозрядні лампи або лазери. Застосування лазерів дозволяє детектувати кількість речовини на рівні 10 -12 р. Метод двухфотонного лазерного збудження віддає можливість використовувати лазер з більш низькою енергією, наприклад, аргоновий. Для впровадження в практику такого методу необхідно мати досить широкий спектр лазерів, що перебудовуються по довжинах хвиль. Чутливість детекторів по флуоресценції для деяких сполук виявляється на кілька порядків вище чутливості детекторів з поглинання, оскільки відлік вдається вести фактично від інтенсивності регістріpyeмогo випромінювання, близькою до нуля, на яку не накладалися збудливу випромінювання.
Розроблено детектори, які можуть одночасно працювати і як спектрофотометри і як Флуоріметри. Детектори з монохроматорамі, що дозволяють вибрати необхідні довжини хвиль для збудливого і флуоресцентного випромінювання, забезпечують високу чутливість і селективність, однак вони виявляються значно більш дорогими, ніж Флуоріметри з постійною спектральної смугою. Одним з надійних Флуоріметри є детектор В«КратосВ».
В якості причин зменшення чутливості детекторів слід вказати на поглинанн...
