з середньої проби 10 г досліджуваної грунту, для перерахунку результатів на 1 г абсолютно сухого грунту;
Зважують порожній бюкс;
Зважують бюкс з сирою грунтом;
Висушити бюкс з наважкою грунту в сушильній шафі при 105 ° С до досягнення постійної маси;
Зважують бюкс з абсолютно сухим ґрунтом;
Визначити зміст абсолютно сухого грунту в 1 г сирої за формулою:
%=100 a/b
а - маса води, що випарувалася, м а=2,5г;
в - маса сухого ґрунту, м в=30,6г;
%=100 2.5/30.6=8.17%
Облік чисельності мікроорганізмів грунту:
Для обліку чисельності мікроорганізмів у грунті застосовують широко поширений метод поживних пластин (метод Коха). Для того щоб ідентифікувати певні бактерії, Кох зробив досить важливе вдосконалення форми живильного середовища, тобто набору поживних речовин, на яких вирощують бактеріальну культуру. Кох став застосовувати тверді середовища. Він висівав виділені бактерії на желатин (згодом желатин замінили на агар). Якщо за допомогою тонкої голки помістити одну-єдину бактерію на таке середовище, то вона почне розмножуватися. По поверхні застиглого агару дочірні мікроорганізми не можуть рухатися, як це відбувається в рідині, і невдовзі навколо того місця, куди помістили бактерію, з'явиться ціла колонія, що складається з точно таких же бактерій. Це метод дозволяє врахувати кількість живих клітин в грунті і виявити видовий і родовий склад, виділити чисті культури бактерій. Але потреба в поживних речовинах у різних мікроорганізмів не однакова, тому суспензію грунту висівають на різні середовища (щільні, рідкі), призначені для різних фізіологічних груп мікроорганізмів [11].
2.3 Приготування грунтової суспензії та посів на живильні середовища
На стерильне годинне скло, попередньо зважене, стерильним шпателем помістити 10 г грунту, щоб на грунт над потрапили мікроорганізми з повітря при зважуванні, годинне скло слід накрити іншим годинниковим склом (попередньо скла і шпателі необхідно профламбированное);
Наважку грунту перенести в колбу, ємністю 250 мл, що містить 100 мл стерильної водопровідної води, інтенсивно збовтати обертальними рухами (Не змочуючи пробку) протягом 10 хвилин, дати відстоятися протягом 5 хвилин;
Методом розведення приготувати грунтові суспензії, що містять різну кількість грунту. Для цього з попереднього розведення стерильною піпеткою переносять 1 мл суспензії в пробірку, що містить 9 мл стерильної водопровідної води, таким чином, розведення в колбі становить 10-1, в пробірках відповідно 10 - 2, 10-3, 10-4 і 10-5 ;
З отриманих розведень провести посів на щільні і рідкі поживні середовища;
При глибинному посіві необхідно взяти 1 мл грунтової суспензії, внести її в стерильну чашку Петрі, залити охолодженим до 45 ° С розплавленим агаром і перемішують з ним;
Посів на кожну живильне середовище проводити в 2 повторностях;
Виявити чисельність груп різних мікроорганізмів, якщо їх чисельність у грунті невелика, методом обростання грудочок ґрунту на середовищі Ешбі і середовищі Гетчетсона, для чого в чашки з середовищем за трафаретом розкласти 30 грудочок грунту, діаметром 3 - 4 мм помістити в термостат при t=28 ° - 30 ° С.
Використовувані живильні середовища для кількісного та якісного обліку мікроорганізмів:
М'ясо-пептони агар (МПА) - (поверхневий посів) враховується чисельність сапрофітних мікроорганізмів, що використовують в якості джерела живлення органічні форми азоту;
Сусло-агар - використовується для виявлення мікроскопічних грибів у грунті (глибинний посів).
Середа Ешбі - виявлення азотфіксуючих аеробних мікроорганізмів шляхом розкладання грудочок грунту.
Середа Гетчинсона - виявлення целлюлозоразлагающіе аеробних мікроорганізмів шляхом розкладання грудочок грунту.
Середа Ваксмана - середа для актиноміцетів (глибинний посів).
2.4 Облік мікроорганізмів на різних середовищах
По кожній із середовищ досвід був проведений у двох повторностях і при обліку узятий середній результат.
Якісна і кількісна оцінка мікроорганізмів на МПА.
Таблиця 1
РазведеніеОбщее кількість колонійКолічество мікроорганізмів в 1 г абсолютно сухої почвиКолічество колоній домінуючих мікроорганізмовДомінірующіе форми, чисельність в 1 г абсолютно сухої почвиДоля домінуючих форм у загальн...
