align="justify"> У зв'язку з цим зміст їх у суміші не можна визначати методом прямої спектрофотометрії і в такому випадку доцільно використовувати метод ВЕРХ. Тільки РФ має специфічну область поглинання більш 350 нм (? Max=373, Е1% 1см=202 і? Max=445 нм, Е1% 1см=243), тому для нього запропонований якісний і кількісний аналіз спектрофотометричним методом.
На основі отриманих даних обрана оптимальна робоча довжина хвилі для аналізу 5 субстанцій, складова? опт=206 нм (див. рис.1). Це значення є максимумом УФ-спектра ЯК, яка має найменшим питомою поглинанням (? Max=206 нм Е1% 1см=5,8) порівняно з іншими компонентами суміші (див. таблицю).
Оскільки всі речовини, що входять в препарат, іоногенні, для їх аналізу доцільно застосовувати обернено-фазну хроматографію з використанням неполярной нерухомою і полярної рухомий фаз. При обернено-фазною хроматографії іоногенних сполук значення водневого показника - один з факторів, який суттєво впливає на ефективність розділення індивідуальних речовин. При роботі з сучасними обернено-фазними сорбентами в складі рухомої фази зазвичай використовують буферні розчини рН від 2,0 до 8,0. Так як вибране оптимальне значення робочої довжини хвилі одно 206 нм, то найкраще застосовувати фосфатний буфер, тому що він не має положення в УФ-діапазоні довжин хвиль понад 200 нм.
Для вивчення поведінки ЯК при різних значеннях рН були зняті її спектри в фосфатних буферних розчинах рН 7,0 і 2,6 (Рис.2). При рН 2,6 спостерігається гіпохромний ефект молекулярної форми ЯК - поглинання знижується в 3 рази порівняно зі спектром при рН 7,0 (при цьому значенні рН дисоціація ЯК повністю пригнічена). З урахуванням цього оптимальним значенням рН рухомої фази є 7,0. Далі було вивчено вплив складу і рН рухомої фази на ефективність розділення компонентів препарату. При рН 2,6 не відбулося повного поділу суміші на індивідуальні піки - Пц, На і ПГ не діляться і виходять першими одним піком, за ними слідують ЯК і Рб у вигляді індивідуальних піків. При рН 5,5 також не було повного поділу компонентів. При рН 7,0 стався повне розділення компонентів суміші. Всі речовини виходили у вигляді окремих піків в наступній послідовності: ЯК, Пц, ПГ, НА і Рб. Однак процес поділу тривалий - 45-50 хв.
Для забезпечення більшої елюіруются сили рухомої фази і прискорення процесу розділення необхідно ввести до її складу менш полярний органічний розчинник. З розчи телеглядачам, найбільш часто вживаних в якості елюіруются агентів в ВЕРХ, за межею прозорості в УФ-світлі при вибраній робочій довжині хвилі (? Опт=206 нм) ми могли застосувати ацетонітрил і метанол, у яких межі прозорості рівні 195 і 205 нм відповідно .
При введенні до складу рухомої фази 2% метанолу час процесу скоротилося, проте пік НА мав високу асиметрію і пік Рб накладався на хвіст піку НА. Після зниження концентрації метанолу до 1% піки Рб і НА перекривалися, однак асиметрія піку НА збільшилася. З метою її зниження в рухому фазу, яка містить 1% метанолу, вводили ацетонітрил.
В результаті експериментів була підібрана рухома фаза - водно-органічна фаза, що складається з фосфатного буфера рН 7,0, що містить 1% метанолу і 0,5% ацетонітрилу, яка забезпечила ефективне розділення всіх 5 компонентів (рис .3). Загальний час хроматографування в цій системі склало 35 хв, а часи утримування компонентів приблизно (в...
