у піків органічних амінів. З цією ж метою в ка честве рухомої фази використовували суміш ацетонітрилу з буферним розчином, зі тримає в якості одного з компонен тов триетиламін, які мають рН=5,0 [18].
Також за допомогою високоефективної рідинної хроматографії був викладений комплексний підхід до конструювання високоефективної технології отримання напівсинтетичних антибіотиків, що включає не тільки стадію ферментативного синтезу, а й стадії поділу компонентів реакційної суміші.
Характеристика антибіотиків
У роботі використовували зразки антибіотиків - ампіциліну, амоксициліну, цефалексину, цефадроксилу і Цефаклор, ацилують агенти - метиловий ефір Д-фенілгліціна і метиловий ефір п - гідрокси - Д-фенілгліціна.
В якості биокатализатора використовували ІММОБІЛІЗОВАНИХ аминоцефалоспоринсинтетазу їх Xanthomonas rubrilineans, штам ВКМ - 629 [24], отриману так, як це описано в роботі [11,12].
Апаратура
Застосовували хроматограф фірми «Waters Associates Inc.» (США) з УФ-детектором зі змінною довжиною хвилі і колонкою з нержавіючої сталі, заповненої носієм «Sylasorb C18» з розміром частинок 4,5 мкм. Швидкість подачі рухомої фази 1 мл / хв.
В якості рухомої фази використовували суміші метанолу з фосфатно-аміачним буфером 0,05 М, pH 2,05 в різних співвідношеннях [13].
.5 Використання ВЕРХ в аналізі антибіотиків групи глікопептидів і рифампіцинів
За допомогою високоефективної рідинної хроматографії проводили якісний і кількісний аналіз ряду антибіотиків-глікопептидів і граміцидину S на вітчизняному жидкостном мікроколоночном хроматографе Міліхром А - 02. Крім того можна також проводити хімічну ідентифікацію антибіотиків в неочищених зразках, що важливо для лабораторій, провідних скринінг природних або напівсинтетичних антибіотиків [30].
При вивчення умови десорбції антибіотиків гр?? Ппи глікопептидів, такі як: еремоміцін, ванкоміцин, ристомицин А і тейкопланін А2 визначили, що вони можуть бути елюіровать з ультрадисперсного вуглецевого сорбенту при викорис танні органічних розчинників (ТГФ, т-БС, IP, ДМСО) в суміші з 0,5 М оцет ної кислотою. Оптимальний розчинник і його концентрацію, що забезпечує найбільш ефективну елюція, підбирали індивідуально для кожного антибіотика. Показано, що для ристомицина А, ванкоміцину і еремоміціна найбільш ефек на елюіруются суміш, що містить т-БС, а для тейкопланіну А2 - TГФ. Після де сорбції фізико-хімічні (молекулярна маса, УФ спектри, час утримання при ВЕРХ) та антимікробні властивості антибіотиків залишалися незмінними [10].
При вивченні антибіотиків групи рифаміцин були отримані продукти деструкції та окислення рифампіцину, які охарактеризовані методом ВЕРХ та ідентифіковані методом мас-спектрометрії. Вивчено стабільність рифампіцину у водній фазі і в складі ліпосом при 4 і 25 ° C. Показано, що при зберіганні основним продуктом деструкції в ліпосоми є 3-формілріфаміцін SV. Встановлено, що антибактеріальна активність антибіотика у складі ліпосом не відрізняється від його активності у водній фазі і не змінюється при зберіганні [22].
.6 Аналіз препарату Рулид і Азитроміцину за допомогою ВЕРХ
Для аналізу двох препаратів були розроблені методики...
