ачення проводили на хроматографі «Water Alian» (USA) з детектором фотодіодною матриці на колонці розміром 150x3, 9 мм. Швидкість подачі елюенту становила 0,7 мл / хв при температурі колонки 37 ° С.
На підставі результатів методик визначення отримали, що розроблений варіант визначень доксорубіцину за методом ВЕРХ, на відміну від фармакопейної (мікробіологічний метод дифузії в агар), характеризується більш високою чутливістю, селективністю і відтворюваністю. Відносна помилка середнього результату (n=5; P=0,95) при визначенні досліджуваної речовини в субстанції та лікарських формах за пропонованою методикою в 2-2,5 рази нижче, ніж при використанні фармакопейної методики. Розроблена методика спрощує процес аналізу, скорочуючи в 35 разів його тривалість (з 18 год до 30 хв) і дозволяє проводити визначення Доксорубіцину в присутності інших компонентів лікарських форм [3]
Також високоефективну рідинну хроматографію використовували для визначення протипухлинного препарату мітоміцину С (ММС) в зразках тканини сечового міхура методом обернено-фазової високоефективної рідинної хроматографії зі спектрофотометричним (365 нм) і мас-спектрометричним детектуванням з межами виявлення (відношення сигнал / шум=3) 50 і 10 нг / мл відповідно. Зразки тканини гомогенизировали і проводили процедуру твердофазной екстракції на патроні DSC - 18. Методика застосована для порівняння ефективності проникнення ММС в тканину сечового міхура за рахунок пасивної дифузії і внутрішньопорожнинного лікарського електрофорезу. Внутрішньопорожнинний лікарський електрофорез підвищує ступінь проникнення митомицина в стінки сечового міхура в 3-5 разів у порівнянні з пасивною дифузією [17].
.4 Застосування ВЕРХ в аналізі антибіотиків групи пеніциліну
Бициллин - 3 є пеніциліном пролонгованої дії і являє собою суміш натрієвої, новокаїнової і бензатіновой солей бензилпеніциліну. За чинним щей ВФС 42-3034-98 визначення бензилпеніциліну в препараті проводять за допомогою високоефективної рідинної хроматографії, новокаїн визначають спектрофотометрично, а бензатин екстрагують ефіром з водного розчину, насиченого хлоридом натрію. Після випарювання ефіру бензатин определя ють титруванням хлорного кислотою. У Європейській Фармакопеї утримуючи ня бензилпеніциліну і бензатину в бензатіновой солі бензилпеніциліну визначають за допомогою градієнтної високоефективної рідинної хроматографії в сме сі метанолу з розчином фосфату натрію при рН 3,5.
Характеристика антибіотика
Використовували бициллин - 3 виробництва АКО «Синтез» (Кур ган).
Апаратура
Дослідження проводили на хроматографі фірми «Waters» (США) з насосом моделі 510, УФ-детектором моделі 481 і ін жектором моделі 7125 (Rheodyne) з дозуючої петлею вміщай мостью 50 мкл. Для детектування використовували довжину хвилі 214 нм, при якій добре детектируются всі аналізовані сполуки. Реєстрацію хроматограмм і розрахунок площ пі ков та основних параметрів утримування проводили за допомогою персонального комп'ютера з аналого-цифровим преобразова телем і програмою «Мультіхром».
Був вивчений обернено-фазний варіант методу ВЕРХ на колонці «Luna С18 (2)» раз мером 250 х 4,6 мм фірми «Phenomenex» (США), оскільки колонка зарекомендова ла себе раніше як відносно дешева з поліпшеною симетрією виход...
