ацій вітамінів А і С в плазмі крови, каротиноїдів, вмісту глутатіону, дієновіх кін югатів (ДК) та малонового діальдегіду (МДА).
Визначення вітаміну С в крови щурів проводили за модіфікованім методом Девятніна В.А. [45]. Принцип методу ґрунтується на екстракції аскорбінової (АК) i дегідроаскорбінової (ДАК) кислот Із тканин помощью тріхлороцтової кислоти. При цьом вікорістовується Утворення забарвленого продукту при Реакції ДАК з 2,4-дінітрофенілгідразіном. Аскорбінова кислота окіснюється до ДАК помощью 2,6-діхлорфеноліндофеноляту натрію, потім візначається сума АК + ДАК. Вміст АК визначаються за різніцею между сумою и ДАК.
Визначення каротиноїдів проводили за методом Frigg M. [44, 45, 37]. Екстракцію проводили гексаном. Визначавши поглінання отриманий розчин на спектрофотометрі при? =441 нм. Розрахунок вели за графіком, побудованому по чистому лютеїну з урахуванням наважки тканини й об`єму отриманий Екстракту. Визначення вмісту глутатіону. Принцип методу Полягає в тому, что глутатіон, реагуючі з надлишком алоксаном, утворює Сполука, что має максимум поглінання при довжіні Хвилі 305 нм и того умовно назвою аллоксан - 305 raquo ;. При цьом комплекс, Який утворівся: аллоксан - 305 прямо пропорційній вмісту відновленого глутатіону в пробі. Вміст глутатіону в тканинах віражалі в мг /% [45].
Концентрацію ДК визначавши у гептованіх Екстракту плазми крови.
Визначення МДА. Для визначення МДА застосовувалі спрощений флюорометрічній метод К. Gagi. [56]. Кінцевій продукт переокиснення ліпідів - МДА - утворює з тіобарбітуровою кислотою флюоресцуючій комплекс, інтенсівність світла которого прямо пропорційна концентрації МДА.
Аналіз крови щурів Було Зроблено на базі Харківського інституту експериментальної та медичної ветерінарії.
4. Вплив хронічного пасивного тютюнопаління на антиоксидантну систему організму щурів
Як известно, захист від АФК та ??вільніх радікалів в організмі здійснюється двома шляхами - неферментативная (вітаміни) i ферментативних.
неферментативная АОС представлена ??жіророзчіннімі вітамінамі [29] и захіщає мембрану ззовні від екзогенніх АФК [59], оскількі вітаміни більшістю локалізовані в мембранах. Оцінка стану неферментатівної АОС проведено за сертифіката № концентрації вітамінів А і С та каротиноїдів в крови щурів.
ферментативних АОС представлена ??ферментні системи (ДП, СОД, пероксидаза), Які захіщають Клітини від ендогенніх АФК та ??вільніх радікалів [45, 59, 60], тому что ферменти локалізовані в цітозолі. Ефективність ферментатівної АОС проведено за сертифіката № вмісту глутатіону в крови тварин.
. 1 Вплив хронічного пасивного тютюнопаління на неферментативная антиоксидантну систему щурів
Вітамін А Виявлено безпосередно в мембранах клітін, отже ВІН регулює пронікність мембран. Зниженя стабільності мембран спостерігається як при авітамінозі, так и при А-гіпервітамінозі [14, 46].
Аскорбінова кислота (АК), за літературними Даними, відновлює токофероксільній радикал, Який утворівся при взаємодії вітаміну Е (токоферолу) з вільнімі радикалами, знешкоджуючі їх, та інгібує ВР окиснення ліпідів [3, 5, 46].
У крови піддослідніх тварин Було Виявлено, хоча и не достовірне, Збільшення концентрації АК и незначна зниженя концентрації ретинолу (табл. 1, рис. 1). На Основі Отримання даних можна пріпустіті, что хронічне пасивне тютюнопаління легких цигарок істотного впліву на вміст вітамінів А і С не має. Альо зниженя концентрації ретинолу может свідчіті про Порушення цілісності мембранних структур.
Таблиця 1 Вміст вітамінів в крови щурів
№Умові експеріменту.Вітамін А; мкг /%. Вітамін С; мкг /%. 1.Самці не «палять 11,28 ± 0,0511,06 ± 0,0302.Самці" палять 10,77 ± 0,3841,07 ± 0,0403.Самкі не «палять 10, 68 ± 0,2501,04 ± 0,0184.Самкі" палять 10,70 ± 0,2651,05 ± 0,022
Рис. 1. Вміст вітамінів А і С у крови щурів
Таблиця 2 Вміст каротиноїдів в крови щурів
№Умові експеріментуКаротіноїді; мкг /%. 1.Самці не «палять 2,14 ± 0,2072.Самці" палять 1,90 ± 0,1313.Самкі не «палять 2,25 ± 0,1504.Самкі" палять 1,80 ± 0,212 *
Рис. 2. Вміст каротиноїдів у крови щурів
Примітка: * вірогідність різниці у порівняні з контрольними Груп при р? 0,05.
. 2 Вплив хронічного пасивного тютюнопаління на ферментативну антиоксидантну систему щурів
Важлива Ланцюг захисту від токсічної Дії перекісів ліпідів є глутатіонпероксідазна система. Одна з фунуцій глутатіонпероксідазі заключається у ві...
