им методом. В якості стандартного агрегує агента використовувався алціановий блакитний в концентрації 0,2%. Для цього вранці натщесерце з ліктьової вени в пластикову пробірку брали 5 мл крові, яку стабілізували 3,8% розчином цитрату натрію в співвідношенні 9:1. Для приготування клітинної суспензії еритроцитів отриману пробу відстоювали протягом 30 хвилин (при 200 С), відбирали плазму, потім тричі відмивали в 10 мл фізіологічного розчину. Облягали еритроцити при центрифугировании зі швидкістю 1000 об/хв протягом 10 хвилин. p align="justify"> Хід виміру:
Попередньо прилад калібрували по двох точках. При цьому світлопропускання зразка еритроцитарної суспензії приймали за 0%, а світлопропускання індуктора в фізіологічному розчині - за 100%. Для оцінки агрегації в кювету приладу послідовно вносили 380 мкл суспензії відмитих еритроцитів, стандартизованої по оптичній щільності, і магнітну мішалку. Швидкість обертання мішалки 700 оборотів в хвилину. Кювету попередньо термостатувати протягом 5 хвилин при 370С. На десятій секунді в кювету додавали 80 мкл 0,2% розчину алціанового блакитного. Запис показників агрегації еритроцитів проводили протягом 10 хвилин, через кожні 30 секунд. p align="justify"> Для оцінки агрегації еритроцитів використовували такі розрахункові показники:
1. V - швидкість агрегації за перші 60 секунд після додавання індуктора (%/хв.).
V = ступінь агрегації на першій хвилині після додавання індуктора Ч 100/максимальна ступінь агрегації.
2. MAX - максимальна ступінь агрегації (%).
. Т - час, відповідне максимальному ступені агрегації (с).
Статистичну обробку даних проводили з використанням пакета статистичних програм В«Statistica 6.0В». br/>
Глава 3. Результати власних досліджень
На першому етапі роботи нами проведено підбір оптимальної концентрації індуктора агрегації еритроцитів (альціановий блакитний). За даними літератури альціановий синій є катіонним барвником фталоціанінові групи і має здатність зв'язуватися з гліколіпідами, гликопротеидами і кислими мукополисахаридами мембрани еритроцитів і тим самим викликати їх агрегацію. У низькій концентрації алціановий блакитний не пошкоджує клітини, не проникає в цитоплазму, але сорбируется у кількості, пропорційній змісту білків і вуглеводів в глікокаліксі [21]. Даний індуктор використовується для визначення агрегаційну властивостей еритроцитів у концентрації 0,05% - 0,4%. p align="justify"> Ми проаналізували агрегаціюеритроцитів здорових осіб з використанням розчину альцианового синього в концентрації від 0,05% до 0,4%. При цьому виявлено дозозалежне збільшення агрегації еритроцитів під дією даного індуктора. При концентрації 0,05% агрегація еритроцитів практично не спосте...
