а або рідина, пов'язана на інертному носії, в адсорбційної хроматографії - сорбент.
Хроматограмма - результат реєстрування залежності концентрації компонентів на виході з колонки від часу.
Детектор - пристрій для реєстрації концентрації компонентів суміші на виході з колонки.
Хроматограф - прилад для проведення хроматографії. [1,2,22,24]
Критерії придатності хроматографічної системи - це ряд діапазонів допустимого зміни параметрів хроматограми, дотримання яких, на думку розробника, необхідно для успішного проходження процедури валідації методики. До параметрів хроматограми відносяться величини, що характеризують хроматографічне розділення: дозвіл R (для пари піків), селективність? (Для пари піків), фактор утримування k (для певного піку), ефективність N (за певним піку з певним фактором утримування), коефіцієнт асиметрії Ka (для певного піку). Виконання критеріїв придатності хроматографічної системи - це необхідна умова успішного проходження процедури валідації, але ще не достатня.
За правилам хорошого тону розробник методики повинен не тільки вказати критерії придатності хроматографічної системи, але і пояснити в деталях, як кожен з критеріїв розраховується. [7,9,21]
. Визначення та розрахунки загальних параметрів і застосовних до всіх хроматографическим методам вимог для придатності системи
Параметри утримування
Час утримування і утримуваний обсяг
Вимірювання утримування в елюентной хроматографії можуть бути представлені часом утримування (tR), певному безпосередньо по положенню максимуму піку на хроматограмі. З часом утримування може бути розрахований утримуваний обсяг (VR).
V R=t R v
tR - час утримування або відстань, виміряний за базовою лінії від точки введення проби до перпендикуляра, опущеного з максимуму піку, відповідного компоненту, v - об'ємна швидкість рухомої фази.
Концентраційний коефіцієнт розподілу.
Концентраційний коефіцієнт розподілу (Dm) (також відомий як коефіцієнт ємності до 'або фактор утримування k) визначається як:
D m=(кількість речовини в нерухомій фазі)/(кількість речовини в рухомій фазі)
K c=V S/V M
K c - коефіцієнт розподілу,
V s - обсяг нерухомої фази,
VM - обсяг рухомої фази.
Значення D m компонента може бути визначене з хроматограми при використанні вирази:
Dm=tR-tM/tM
t R - час утримування (або об'єм) або відстань, виміряний за базовою лінії від точки введення проби до перпендикуляра, опущеного з максимуму піку, відповідного компоненту,
t M - «мертве» час (або об'єм): час (або об'єм) або відстань, виміряний за базовою лінії від точки введення проби до перпендикуляра, опущеного з максимуму піку, відповідного неутримуючих компоненту.
Коефіцієнт розподілу.
Характеристика елюювання в ексклюзивні хроматографії може бути представлена ??коефіцієнтом розподілу (K0), який розраховують за допомогою формули:
K про=(t R t о)/(ttt о)
t R - час утримування (або об'єм) або відстань, виміряний за базовою лінії від точки введення проби до перпендикуляра, опущеного з максимуму піку, відповідного компоненту,
t0 - «мертве» час (або об'єм): час (або об'єм) або відстань, виміряний за базовою лінії від точки введення проби до перпендикуляра, опущеного з максимуму піку, відповідного неутримуючих компоненту,
tt - час утримування (або об'єм) або відстань, виміряний за базовою лінії від точки введення проби до перпендикуляра, опущеного з максимуму піку, відповідного компоненту, який повністю проникає в пори нерухомої фази.
Фактор утримування (рухливості)
Фактор утримування (рухливості RF), використовуваний в площинний хроматографії, являє собою відношення відстані від точки нанесення проби до центру плями і відстані, пройденого фронтом розчинника від точки нанесення проби.
R F=b/a
b - відстань, пройдену речовиною,
a - відстань, пройдену фронтом розчинника.
Хроматографічні параметри.
Пік може бути охарактеризований площею піку (A) або висотою піка (h) і шириною піку на половині висоти (wh) або висотою піка (h) і шириною піку між точками перегину (w). Для гауссовских піків справедливе співвідношення: <...
