>
.3 Методика У паперовій хроматографії речовини розрізняються за їх відносному положенню на папері після того, як розчинник пройде певну відстань. Невелика кількість розчину суміші (10-20 мкл), яку потрібно розділити, наносять у зазначену точку на папері і висушують. Отримане пляма називають стартовим. Потім папір поміщають в герметичну камеру і один її кінець занурюють в розчинник, який є рухомою фазою. Під дією капілярних сил розчинник рухається по паперу, розчиняючи і захоплюючи за собою компоненти зразка. До початку руху зразок повинен повністю розчинитися, тому швидкість розчинення компонентів у рухомій фазі є одним з факторів, що визначають ефективність розділення. Після того, як розчинник пройде певну відстань, лист виймають і сушать. Потім утворилися плями, які можуть бути як видимі, так і невидимі, виявляють і відзначають. p align="justify"> Ставлення відстані, пройденого плямою, до відстані, пройденого розчинником стандартно позначається Rf . Ця величина залежить від речовини, паперу і природи розчинника. Паперові хроматограми можуть проявлятися у висхідному, низхідному і горизонтальному струмі розчинника, що слабо відбивається на їхній якості. Тому вибір визначається іншими чинниками: порівняно з висхідною хроматографією спадна має певні переваги. А саме, вона вимагає менше часу і не обмежена за довжиною пробігу. З іншого боку, для низхідної БХ грає важливу роль ретельність підготовки камери, так як забруднення або поганий контакт папери в місці зіткнення зі стінкою човники може призводити до неоднорідного струму і, як наслідок, утворення смуг.
Буш і Кроушоу запропонували методику швидкісний БХ . Ця методика передбачає застосування більш вузьких камер, горизонтальне хроматографування, насичення атмосфери камери парами розчинювальною системи, а головне - попередню просочення паперу водної нерухомою фазою. Нерідко досить ефективна виявляється т. зв. двовимірна БХ , яка полягає в тому, що після проведення хроматографії в одному напрямку папір висушують і повторно хроматографіруют з іншим розчинником під прямим кутом до початкового напрямку. При цьому часто відбувається поділ речовин, які не розділяються в першому розчиннику.
Виявлення
Плями на хроматограмах можуть бути виявлені за кольором, флуоресценції, за допомогою хімічних реакцій, для чого папір обприскують або занурюють у різні реагенти, або ж по радіоактивності. Ідентифікацію проводять звичайно шляхом порівняння із зразками з відомими величинами Rf або після елюювання, яке зводиться до вирізання зони, яка містить пляма, і подальшого промиванню її відповідним розчинником .
1.4 Суть метод...
