ться їх поступове випаровування, яке призводить до зміни складу елюенту.
При знижених температурах з'являються проблеми в роботі з елюентом, збагаченими водою і / або містять спирти. В'язкість таких елюентів різко зростає при зниженні температури, що призводить до підвищення тиску в системі.
Вплив невеликих коливань температури на поділ можна усунути, термостатіруя хроматографическую колонку, або всю рідинну систему (що можливо не для всіх хроматографов).
. Якість електроживлення. Більшість сучасних хроматографов оснащено системами стабілізації живлення, проте, якість електроживлення на місці також має бути високим. При недостатньо хорошому електроживленні будь запуск серії визначень в автоматичному режимі може закінчитися невдачею через збій.
. Чистота розчинників. Для приготування рухливих фаз слід застосовувати особливо чисті розчинники.
У загальному випадку, вимоги, що пред'являються до чистоти рухомої фази, залежать від способу детектування, методу елюювання (ізократіческого або градієнтного), чутливості детектора до цільового аналіту і його концентрації.
При застосуванні УФ детектування вимоги до чистоти розчинників підвищуються при переході до коротковолновому діапазону, менш 230-240 нм. Для ізократіческого елюювання при УФ детектировании на довжинах хвиль, великих 220-240 нм, можна застосовувати розчинники марки «ос. ч. » і воду-дистилят. Всі реагенти, що додаються в рухому фазу, також повинні бути достатньо чистими; кристалічні реагенти перед застосуванням буває корисно перекристалізованого.
Для градієнтного елюювання необхідно застосовувати розчинники марки «для рідинної хроматографії» («For liquid chromatography») і воду-бідистилят. Особливі вимоги у методі градієнтного елюювання (в обернено-фазової хроматографії) пред'являються до чистоти водного буфера і води зокрема. Насамперед це пов'язано з тим, що на початковій стадії елюювання адсорбент поглинає з збагаченої водним буфером рухомої фази забруднюючі компоненти, які надалі елюіруются і виявляються на хроматограмі у вигляді «горбів», «порогів» та окремих піків, сильно ускладнюють виділення корисних сигналів аналітів.
Найбільш чисті розчинники потрібні для проведення групових визначень слідових кількостей речовин в режимі градієнтного елюювання.
Для виконання визначень в градієнтному режимі елюювання, а також прецизійних визначень в ізократіческом режимі, рухома фаза повинна застосовуватися одноразово, тобто елюат повинен скидатися або утилізуватися.
При ізократіческом Елюювання, якщо немає особливих проблем з чутливістю, відпрацьований елюент можна застосовувати повторно. Система, в якій елюат після проходження через детектор надходить назад у ємність з рухомою фазою, називається «системою з рециклом». Особливо корисною така система виявляється в разі проведення великого числа рутинних ізократіческіх визначень на стандартних колонках (250х4.6, 150х4.6) при об'ємної швидкості порядка 1 мл / хв. У цих випадках система з рециклом забезпечує економію до 200-300 мл органічного розчинника в день. Така економна система дозволяє застосовувати для аналізу дуже чисті, дорогі розчинники. Питання економії дорогих розчинників стоїть менш гостро в разі застосування мікроколонок (80х2, 100х2), оскільки для проведен...
