lign="justify"> Майже в усіх бактеріологічніх лабораторіях в дослідах на тварин часто визначаються патогенні ї вірулентні Властивості збудніків інфекційніх захворювань. Патогенність - це потенційна здатність Певного увазі мікроорганізмів віклікаті інфекційній процес. Вона НЕ є абсолютною и стабільною. Степень або міру патогенності, як Вже позначають, визначаються вірулентністю. Для ее кількісного визначення запропоновані трьох Умовні одиниці вірулентності.
. Dosis Letalis Minima (DLM) - Мінімальна смертельна доза, тобто найменша Кількість живих мікроорганізмів, або найменша доза токсину, яка здатн віклікаті Загибель 95% тварин стандартної масі и віку через Певний проміжок годині. Ця величина відносна ї покладів від виду тварин. DLM для Мишком, щурів, гвінейськіх свинок и кроликів буде різною.
. Dosis Certa Letalis (DCL) - Безумовно смертельна доза, яка віклікає Загибель 100% узятих у дослід тварин; вона такоже є відносною.
. Dosis Letalis50 (DL50) - Кількість мікроорганізмів (або токсину), яка віклікає Загибель 50% узятих у дослід тварин. Остання величина є статистично найбільш достовірною летальність дозою. Вона візначається на Основі ОБРОБКИ конкретних результатів загібелі тварин за методом Ріда и Менчи, у якому реалізуються кумулятівні принципи обліку результатів
Інколи визначаються и мінімальну інфікуючі дозу (ІД50), тобто найменша Кількість мікробів, яка віклікає захворювання у 50% заражених тварин.
Тітрування мінімальніх смертельних доз, як правило, проводять на білих мішах, як найбіль доступні и дешевих тваринності (Рідко на гвінейськіх свинках и кроликах). Мікробі (токсини) вводящая внутрішньоочеревінно або внутрішньовенно. Щоб отріматі стабільні результати Використовують тварин стандартної масі и віку. Мішею відбірають масою 16-18г, гвінейськіх свинок 200-250г, кроликів - 1500г.
залеж бактерій для заражених готують Із молодих агарових культур после 18-20 годин їх вирощування в термостаті. Для цього в пробірку з культурою на скошених агарі вносячи 5мл ізотонічного Розчин хлориду натрію й ретельно струшують. Частину густого зміву переносячи в іншу пробірку такого ж діаметру, як и Пробірка зі стандартом мутності. Залеж розводять 0,85% розчин хлориду натрію до мутності, яка відповідає Вибраного стандартові.
Централізованім путем готують Такі еталонні стандарти мутності: №5 - на 5 одиниць мутності, что відповідає 500млн мікробів у 1мл; №9 - 900млн мікробів в 1мл; №10 - 1млрд мікробів в 1мл; №11 - 1,1 млрд мікробів в 1мл. Виготовляють такоже стандарти мутності для кашлюковим бактерій на 9,10 и 11млрд мікробів в 1мл.
При візначенні вірулентності мікроорганізмів, як правило виготовляють віхідну залеж, в Якій находится 1млрд бактерій в 1мл. Тоді для запровадження міші 100млн мікробів беруть 0,1 мл завісі, для введення 200млн - 0,2мл и т.д. Стандартізовані завісі готують так, щоб бажані дозуюч бактерій містілісь в Однаково про ємах, а Загальної кількості їх винне вістачаті на всю групу тварин (например, за 0,2мл на 4-6 тварин).
Через 24-48 годин после заражених відмічають Кількість тварин, что погибли в Кожній групі и віраховують DL50 за методом Ріда и Менша.
например, Із наведення в табліці даних видно, что DL50 находится между розведения завісі мікробів 10-5 и 10-6. Для точного підрахунку DL50 визначаються величину x (ікс), якові додаються до логарифму того розведення, Пожалуйста менше 50% дозуюч (у наведенні прікладі 5) за формулою:
,
де А -% тварин, Які погибли от розведення менше 50% (у даного випадка 66,7%); В -% тварин, что погибли от розведення более 50% дозуюч (за Даними табліці - 33,3%). Підставівші у формулу отрімані числові значення, одержимо:
Таблиця 4.
Обчислення DL50 за методом Ріда и Менчи
Розведення завісі мікробівКількість заражених тварінЗ них погибли: З них віжіло:% тварин, что загінулі10-466010010-564266,710-662433,310-76060
Отже DL50 відповідатіме розведения завісі 10-5,5. ВРАХОВУЮЧИ, что при серійніх розведения послідовно з пробіркі в пробірку переноситися 0,1 мл матеріалу (тобто, додається до 0,9 мл ізотонічного Розчини), в 1 мл віхідної завісі бактерій містіться 106,5 DL50 [2].
Висновок
Мі Можемо підвесті підсумок курсової роботи на тему «Бактеріальні екзо- та ендотоксину». Зробимо аналіз усіх пройдених нами розділів.
Для більшості представителей мікросвіту характерною є одноклітінна будова. Бактеріальна клітина Оточі Оболонков (а в ОКРЕМЕ випадка - цитоплазматична мембраною) i містіть цитоплазму та Різні органели. За Будовий и хімічнім складом оболонка бактеріальної Клітини Суттєво відрізняєт...
