рно полили дистильованою водою і, для додання нерівності поверхні, стерильною голкою повідомили шорсткий мікрорельєф. У кожну чашку Петрі, злегка притискаючи до грунту, поклали по п'ять стерильних покривних стекол. Культивували водорості при температурі 20 В± 3 Вє C, та висвітленні лампи денного світла потужністю 1700-2500 лк 10-14 годин щодня. Не допускаючи перезволоження, грунт періодично поливали дистильованою водою в міру її підсихання.
При методі агаризованих чашок Петрі [48] приготовлену середу (таблиця 1) стерилізували при температурі 120 Вє C протягом 20 хвилин, потім охолодили його до 50-60 Вє C, після чого розлили у стерильні чашки Петрі.
Таблиця 1 - Склад основного середовища Болда
Розчини макроелементовісх. - 400 мл, гпер. - 100 мл, г1NaNO310, 0 (30,0 - 3N BBM) 2,5 (7,5) 2KH2PO471, 753K2HPO430, 754MgSO4 В· 7H2O30, 755CaCl2 В· 2H2O10, 256NaCl10, 25Раствори мікроелементовісх. - 1000 мл, гпер. - 250 мл, г1ЕДТА5012, 5KOH317, 752FeSO4 В· 7H2O4, 98 (999 мл H2O і 1 мл конц. H2 SO4) 1,245 (249,75 мл H2O і 0,25 мл конц. H2 SO4) 3H3BO311, 422,8554 ZnSO4 В· 7H2O8, 822,205 MnCl2 В· 4H2O1, 440,36 MoO3 (MoO3 В· H2O) 0,71 (0,798) 0,1775 (0,1995) CuSO4 В· 5H2O1, 570,3925 Co (NO3) 2 В· 6H2O0, 49 (999 мл H2O і 1 мл конц . H2 SO4) 0,1225 (249,75 мл H2O і 0,25 мл конц. H2 SO4)
Нагріту середу тримали при температурі 50-60 Вє C, помістивши на водяну баню. Після застигання середовища чашки перевернули і зберігали в повітронепроникному контейнері при температурі 4 Вє C в холодильнику до засіву. У кожну чашку на агар поклали по 5 варіантів грунту кожного зразка, ретельно обмотали стінки парафільмом для збереження стерильності.
Культивування проводили в кліматостате КС-200 при постійних умовах: температура 20 В± 3 Вє С, періодичне освітлення з інтенсивністю 2500-3000 лк з 14/10-часовим чергуванням світлової та темнової фаз.
Через два тижні після початку культивування водоростей проводили перший перегляд стекол грунтових культур під мікроскопом XSP-136. Для цього одне покривне скло з кожної чашки акуратно знімали і, видаливши з нього великі частки грунту, клали на предметне скло в краплю води. Наступні перегляди проводилися з інтервалами в один і півтора місяці. p align="justify"> Під час микроскопирования перевірку стекол обростання на наявність водоростей проводили на п'яти трансект.
Для перегляду агарових культур стерильною бактеріальної петлею брали зішкріб водорослевих розростань і поміщали ...
