ис. 2. Розподільна хроматографія з прищепленої фазою (нормально-фазний варіант).
Обернено-фазова рідинна хроматографія заснована на розподілі компонентів суміші між полярним елюентом і неполярними групами (Довгими алкільними ланцюжками), щепленими до поверхні сорбенту (рис. 3). br/>В
Рис. 3. Розподільна хроматографія з прищепленої фазою (звернення-фазний варіант).
Менш широко використовується варіант рідинної хроматографії з нанесеними фазами, коли рідка нерухома фаза наноситься на нерухомий носій.
Ексклюзивна (гельпронікающая) хроматографія являє собою варіант рідинної хроматографії, в якому поділ речовин відбувається за рахунок розподілу молекул між розчинником, що знаходяться в порах сорбенту і розчинником, що протікає між його частинками.
Афінна хроматографія заснована на специфічних взаємодіях поділюваних білків (антитіл) з прищепленими на поверхні сорбенту (синтетичної смоли) речовинами (антигенів), вибірково утворюють з білками комплекси (кон'югати).
Ионообменная, іон-парна, лігандообменная хроматографії застосовуються в основному в неорганічному аналізі.
Основні параметри хроматографічного розділення.
Основними параметрами хроматографічного розділення є утримуваний обсяг і час утримання компонента суміші (рис. 4).
Час утримування tR - це час, що минув від моменту введення проби в колонку до виходу максимуму відповідного піку. Помноживши час утримування на об'ємну швидкість елюенту F, отримаємо утримуваний обсяг VR:
VR = tR . F;
виправлене час утримування - час, що минув з моменту появи максимуму піку несорбіруемого компонента до піку відповідного з'єднання:
tR '= tR - t0 ;
Наведений або виправлений обсяг утримування - це обсяг утримування з поправкою на мертвий обсяг колонки V0, тобто на обсяг утримування несорбіруемого компоненти:
VR '= VR - V0;
Характеристикою утримування є також коефіцієнт ємності k ', який визначається як відношення маси речовини в нерухомій фазі до маси речовини в рухомій фазі: k '= mн/mп;
Величину k 'легко визначити за хроматограмме:
В
В
Найважливішими параметрами хроматографічного розділення є його ефективність і селективність.
Ефективність колонки, вимірювана висотою теоретичних тарілок (ВЕТТ) і обернено пропорційна їх числа (N) тим вище, ніж вже пік речовини, що виходить при тому ж часу утримування. Значення ефективності може бути обчислено за хроматограмі за такою формулою:
N = 5.54 . (tR/1/2) 2 ,
де tR - час утримування,
w 1/2 - ширина піку на половині висоти
Знаючи число теоретичних тарілок, що припадає на колонку, довжину колонки L і середній діаметр зерна сорбенту dc, легк...
