шого відбору.
5-10 проб сироватки крові корів і 5-10 проб молозива.
З найбільшою сталістю вірус вдається виявити в пробах фекалій, взятих у перші дні хвороби, тому для дослідження придатні проби фекалій, узяті від 1-12 денних телят з клінічними ознаками діареї на 1-3-й день хвороби . Відразу ж після доставки в лабораторію проби піддають дослідженню або зберігають при + t В° С не більше доби, а при -20 В° С - 50 В° С - до 1 місяця. При температурі +4 +10 В° З сироватку крові зберігають не більше 7 днів, при - 20 В° С до 1 місяця, молозиво при +4 В° С - не більше 2 днів, при -20 В° С - до 1 місяця.
Для вірусологічних або електронно мікроскопічних досліджень готують 10% суспензію фекалій на розчині Хенкса, яку гемогенезіруют і центрифугують 1 годину при 3000 об/хв, супернатант переносять у стерильний флакон, додають пеніцилін і стрептоміцин (по 1000 ОД /мл), витримують 12 годин при +4 В° С і досліджують.
Виділення ротавірусу і коронавірусу в культурі клітин. Проведені дослідження показують кореляцію між захворюваннями новонароджених телят діареєю з присутністю ротавирусного і коронавирусной антигену у фекаліях. Слід мати на увазі, що звичайними методами вірус не культивується, а застосування додаткових впливів - хімічних (трипсин) та фізичних (центрифугування вірусу в шарі клітин) - дає позитивні результати при високих концентраціях вірусу в фекаліях, що підтверджується електронною мікроскопією. Для вірусологічних досліджень вміст кожної пробірки, після відтавання і обробки поліетиленгліколем ресуспендіруют в 0,1 мл дистильованої води і досліджують за допомогою електронного мікроскопа. У позитивному випадку виявляють типові частинки вищевказаних вірусів і їх скупчення. Специфічний характер частинок підтверджують методом іммуноелектронной мікроскопії з використанням сироватки крові лабораторних тварин (кроликів, морських свинок), імунізованих ротавирусом або короновірусом мавп (SA 11) або сироватку реконвалесцентів. Зміст і специфічність антитіл у сироватках реконвалесцентів можуть бути перевірені в серологічних реакціях з використанням вірусу SA 11. При позитивному результаті вірусні частки виявляються в препаратах у вигляді специфічних скупчень (імунних комплексів).
Для виявлення вірусних антигенів в заморожених зрізах тонкого кишечника, мазках фека...
