,35
0,015
0,02565
51,3
4
0,2
0,3
0,02
0,0342
68,4
5
0,25
0,25
0,025
0,04275
85,5
В· Спосіб другий - вибудовувати калібрувальний графік по готовому набору реактивів. (Наприклад, набір Білірубін-еталон фірми Лахема, що включає в себе білірубін ліофілізований (Точна концентрація білірубіну наведена на етикетці флакона); і альбумін ліофілізований.)
Визначення білірубіну в сироватці крові прямим фотометричним методом
Визначення загального білірубіну прямим фотометричним методом надзвичайно просто, зручно, чи не вимагає венепункції (досліджується капілярна кров), може повторюватися неодноразово протягом доби. Недоліком методу є неможливість визначити фракції білірубіну, менша точність при вираженому гемолізі.
Незважаючи на те, що при цьому визначається лише загальний білірубін, цей підхід являє значний інтерес в неонатології, так як у новонароджених дітей переважає одна похідна білірубіну, практично рівна концентрації загального білірубіну. Білірубін являє собою пігмент з яскраво вираженою жовтим забарвленням. Його спектральна крива поглинання має максимум на довжині хвилі 460 нм (синя область спектру). Вимірюючи поглинання на цій довжині хвилі можна було б визначити концентрацію загального білірубіну в крові. Проте ряд факторів ускладнюють такий вимір. Білірубін є сильним поглиначем і тому оптимальна для побудови фотометра щільність 0,3-0,5 Б оптичної щільності досягається в кюветі з довжиною оптичного шляху приблизно 250 мікрометрів (0,25 мм).
Виготовити таку кювету непросто. Крім того, фотометрірованіе безпосередньо крові ускладнюється присутністю формених елементів крові, розсіюванням світла на них, а також інтерференцією білірубіну з гемоглобіном, який частково поглинає світло в синій області спектру. Тому для фотометрірованія необхідно, по-перше, отримати зразки плазми крові, а, по-друге, потрібно виключити вплив гемоглобіну, присутнього в невеликій кількості в плазмі. Плазму для фотометрірованія отримують на лабораторних центрифугах в гепаринизированной гематокритное капілярах.
фотометрірованія можна проводити на спектрофотометрах на двох довжинах хвиль 460 і 550 нм, на яких гемоглобін має однакові коефіцієнти поглинання, а білірубін має максимум поглинання на довжині хвилі +460 нм і не поглинає на довжині хвилі +550 нм. Саме це дозволяє виключити вплив гемоглобіну при вимірюванні концентрації білірубіна.Однако спектрофотометри загального призначення мало придатні для таких рутинних вимірювань, так як необхідно мати спеціальні кювети з малої оптичної завдовжки. Прикладом такого спеціаліірованного фтометра може служити фотометр Білі...
