хом фотографування. До недоліків слід віднести її низьку чутливість. p>
4. ПАСАЖ ВІРУСУ, проведення мікроба (resp. вірусу) через організм сприйнятливої вЂ‹вЂ‹тварини з метою посилення вірулентності; метод вперше запропонований Пастером. Тварина заражається мікробом; потім його вбивають або воно гине, і з його органів виділяють чисту культуру, знову заражаючи нею нова тварина і повторюючи цю процедуру будь-яке число разів. Можна пасерувати також органи, заражаючи тварина культурою мікроба і вводячи новим тваринам емульсію органів зараженого. Чиста культура виділяється тільки після відомого числа пасажів. p> Метод розмноження вірусів в культурах клітин: Культура клітин - це клітини багатоклітинного організму, що живуть і розмножуються в штучних умовах поза організмом (in vitro). Методика культивування клітин особливо успішно стала розвиватися після 40-х років цього століття. Цьому сприяли такі обставини: відкриття антибіотиків, що запобігають бактеріальне зараження культур клітин, відкриття Хуангом (1943) і Ендерсом (1949) здатності вірусів викликати специфічну деструкцію клітин
(цитопатичної ефект) - зручний метод індикації вірусів в культурах клітин, і, нарешті, Дульбекко і Фогт (1952) запропонували методику тріпсінізаціі тканин і? отримання одношарових культур клітин. У вірусологічній практиці застосовують такі культури клітин: первинно-трипсінізірована культури клітин - клітини, отримані безпосередньо з органів або тканин організму, що ростуть in vitro в один шар. Культуру клітин можна отримати практично з будь-якого органу або тканини людини або тварини (дорослого або ембріона). Проте краще це вдається зробити з ембріональних органів, так як клітини ембріонів мають вищої потенцією росту. Найчастіше для цих цілей використовують нирки, легені, шкіру, тимус, тестікули ембріонів або молодих тварин. Для отримання первинних клітин від здорової тварини не пізніше 2-3 год після забою беруть відповідні органи або тканини, подрібнюють їх на шматочки (1-4 мм) і обробляють ферментами: трипсином, панкреатином, колагеназою та іншими (частіше трипсином). Ферменти руйнують міжклітинні речовини, отримані при цьому окремі клітини суспендують у живильному середовищі і культивують на внутрішній поверхні пробірок або матраців в термостаті при 37? В° С. Клітини прикріплюються до скла і починають ділитися. У розвитку культур клітин розрізняють кілька фаз: адаптації, логарифмічного росту, стаціонарну і старіння (загибель клітин). Розмножуючись, клітини розміщуються на поверхні скла і при повному покритті його в один шар контактують один з одним і припиняють ділитися (контактна інгібіція). На склі формується шар товщиною в одну клітку (тому ці культури клітин називають одношаровими або моношаровій). Моношар зберігає життєздатність протягом 7-21 днів. Для культивування вірусів використовують молоді культури клітин (як
тільки сформувався моношар). Субкультури. У вірусологічній практиці часто використовують субкуль...
