p>
Особливості імунного відповіді . Механізми імунного ответа на введення ДНК-вакцин, не досліджені. При імунізації вбитими (Хімічними, суб'едінічнимі) вакцинами екзогенні антигени руйнуються до пептидів всередині ендосомних компартментов клітини. Далі вони з'являються на поверхні цих клітин в з'єднанні з молекулами головного комплексу гістосумісності II класу (МНС-и). Їх розпізнавання СД4 + Т-Хелперн лімфоцитами (Th) спонукає останніх до секреції розчинних факторів (Цитокінів), що регулюють ефекторні механізми гуморального імунної відповіді. p> Ефективність імунізації . J.J. Donnelly et al. (1995) спостерігали перехресно-штаммовий (видоспецифічний) імунітет щодо збудників грипу. Самок мишей лінії BALB/c в 4 -, 7 - і 10-тижневому віці імунізували 100 мкг плазмідної ДНК з геном нуклеопротеина (NP), клонованою з генома вірусу грипу A/PR/8/34 (H 1N1) (рис. 1, А, сині гуртки). Мишам контрольної групи вводили за цією ж схемою векторну плазміду без клонованого гена (світлі кружки). У 13-тижневому віці гризунів інфікували інтраназально 200 LD 50 вірусу А/НК/68 (H3N2). Мишей інший експериментальної групи вакцинували за такою ж схемою очищеним NP, а контрольної - не імунізували. Тварин інфікували інтраназально 200 LD 50 вірусу А/НК/68 (H3N2). p> Захисний ефект при імунізації ДНК-вакциною становив 100%, а при використанні хімічної вакцини на основі цього ж антигену він був відсутній.
Цікаву конструкцію плазмідної вектора для імунізації тварин проти вірусу кліщового енцефаліту розробили Є.Е. Митрофанов і співавт. (1997). Вектор включає ген глікопротеїну оболонки віріона і ген неструктурного глікопротеїну NS1, який знаходиться на поверхні інфікованих вірусом кліщового енцефаліту (ВЕК) клітин. Захисний ефект ДНК-імунізації досліджували на мишах лінії BALB/c. Тварин +5-кратно імунізували 80-100 мкг вектора pSVK3-ENS1 і через тиждень після останнього щеплення інфікували 100 LD 50 ВЕК (Штам Софьин). У контрольній групі захворіли все миші і 43% з них загинули. Тварини, імунізовані ДНК-вакциною, залишалися здоровими протягом всього терміну спостереження.
При вивченні тривалості імунної відповіді Н.L. Davis виявили, що після ДНК-імунізації мишей геном поверхневого антигену вірусу гепатиту В рівень антитіл виходить на плато на 104 добу і залишається стабільним 18 міс. Бустерна імунізація через 7 міс збільшувала кількість антитіл більше ніж у 10 разів. Теоретично за допомогою ДНК-вакцини при одноразовому її запровадження можна досягти довічної резистентності імунізованих особин до одного або кількох збудників інфекційних хвороб. p> Масова імунізація . Деякі автори говорять про дешевизну ДНК-вакцин, проте дослідники, які самі виділяли плазмідну ДНК, добре представляють, що отримання в лабораторних умовах 100 мкг плазмід для імунізації тільки однієї миші - процес трудомісткий. Тим більше що в будь-якому препараті ковалентно замкнута кільцева (КЗК) плазміда при зберіганні поступово утворює відкрито кільцеві та лінійні форми, трансфецірующая активність яких у 100 і більше разів нижче, ніж у КЗК форм ДНК плазмід. Тому ДНК-вакцина, призначена для імунізації тварин в умовах господарств, повинна бути розроблена для внутрішньошкірної ін'єкції, тобто являти собою композицію, складається з дрібних твердих часток з сорбованих на них плазмідними ДНК. Внутрішньошкірне введення ДНК-вакцини доцільно здійснювати стисненим повітрям з допомогою спеціального точно дозуючого апарату. Альтернативним способом введення ДНК-вакцин може бути саморуйнуються бактеріальні вектори, застосовувані перорально. p> Нові інфекції . ДНК-вакцини можуть стати важливим елементом заходів, спрямованих на ліквідацію спалахів нових інфекцій серед сільськогосподарських тварин. Клонування в плазмідний вектор за допомогою ПЛР гена повнорозмірного оболочечного глікопротеїну вірусу вимагає не більше тижня, після цього ДНК-вакцина готова для застосування в осередку епізоотії. В екстреному випадку, при невідомості гена протективного антигену, можна використовувати експресійної бібліотеку генів. Доцільно заздалегідь підготувати плазміди, експресуючі гени протективних білків збудників африканської чуми свиней, везикулярного стоматиту великої рогатої худоби, чуми рогатої худоби, ящуру та деяких інших. p> Переваги ДНК-імунізації перед поширеними способами імунопрофілактики масових інфекційних хвороб тварин полягають в тому, що ДНК-вакцини без персистування в макроорганізму наближають штучно викликається імунний відповідь до можливого при інфікуванні природними збудниками; імунна реакція на введення генів антигенів збалансована і складається з системного та місцевого відповідей. Кожен з них включає іммуноглобуліновий і клітинний відповіді. Імунний відповідь такого типу важливий для протидії інфекціям, викликаним вірусами і грамнегативними мікроорганізмами. br/>В
Висновок
...
