для імунізації. Якщо при імунізації класичними суб'едінічнимі вакцинами вводять мікрограми протеїну, то при використанні ДНК-вакцини - нанограми і навіть менше. Говорячи про мінімальну кількість ДНК, достатньому для індукції імунної відповіді, С.А. Джонстон, директор Центру біомедичних винаходів Техаського університету, зазначає, що за допомогою генного пістолета можна одноразово ввести миші В«фактично 27 тис. різних плазмід і отримати імунну відповідь на індивідуальну плазміду В».
Вчені з Інституту біоорганічної хімії (ІБХ РАН) розробили універсальний спосіб отримання мікрокапсул - свого роду мініконтейнер заради зілля або вакцин. У багатошарову біодеградіруемие полімерну оболонку можна впроваджувати білки, ДНК, інші молекули. На основі таких мікрокапсул розробляють вакцини новоспеченого покоління - ДНК-вакцини.
Схожих мікроконтейнерів заради доставки, наприклад, ДНК, придумано не так багато. Є зарубіжні аналоги, в яких оболонка капсули виконана з полімолочной кислоти. На їх основі створюють вакцини проти гепатиту і навіть СНІДу. p> У пористу мікросферу з карбонату кальцію (CaCO3) впроваджують білок, ДНК, інші речовини, які потрібно доставити в організм. Покривають її напівпроникною оболонкою з небагатьох шарів природних полімерів - полісахаридів. Можна покрити каркас поліпептидами або придбати комбіновану оболонку. Якщо мікросфери в полімерній оболонці помістити в підкисленою розчин, карбонат кальцію всередині розчиниться і піде через полімерну мембрану. Всередині залишиться тільки білок або ДНК, що підлягають транспортуванню. Мікрокапсули з бадьорою В«НачинкоюВ» готові
Середній діаметр мікрокапсул заради доставки ДНК-вакцин - 1-2 мікрона (мкм). Його можна зменшити, якщо узяти карбонатні мікросфери меншого розміру. Такі мікрокапсули можна ввести підшкірно або навіть в кров. Короткий розмір забезпечує їм вільне дію по судинах: вони менше еритроцитів (діаметр яких 7,2-7,5 мкм), пластичні, змінюють форму, протискуючись через витончені капіляри. Клітини В«ЗаковтуютьВ» капсули, їх оболонка розчиняється клітинними ферментами, випускаючи бадьору В«начинкуВ».
Метод дозволяє не просто доставити лікарські речовини в клітини організму, але продовжувати і регулювати час їх руху. Якщо в мікрочастку разом, наприклад, з ДНК або зіллям помістити фермент, який розщеплює оболонку капсули зсередини, вивільненням зілля можна правити: чим менше ферменту, тим повільніше руйнується оболонка.
Російські вчені успішно застосували мікрокапсули заради отримання ДНК-вакцин, випробували їх на клітинних лініях і лабораторних мишах. Традиційна вакцина містить білки вірусів чи бактерій, ДНК-вакцина - гени таких білків. Білки-антигени традиційної вакцини скоро руйнуються, оскільки чужорідні. Те ж відбувається з некапсулірованной ДНК - її в організмі скоро розщеплюють відповідні ферменти. Микрокапсулированная ДНК, потрапивши в клітини, дозволяє організму самому виробляти достатню кількість антигену, що формує імунітет. Це виникає в рух тривалого часу: в організмі капсули поступово, як мінімум місяць, розчиняються і допомагають потрібну концентрацію антигену, що важливо заради виховання стабільного імунітету.
Привабливість ДНК-вакцин полягає у відносній простоті їх створення, дешевизні виробництва і зручність зберігання, що дозволило деяким авторам заговорити про ДНК-вакцинах, як про вакцини третього покоління і про що сталася революції у вакцинації. Однак, їх широке застосування стримується деякими побоюваннями, викликаними, в першу чергу, теоретичної можливістю впровадження такої чужорідної ДНК в геном вакцинованого організму. Тим не менш, до цих пір не отримано скільки-небудь переконливих доказів вбудовування ДНК таких вакцин в геном ссавців, у той час, як є безліч підтверджень про тривале існування введених в організм ДНК-вакцин у формі вихідної плазміди. Втім, подібні побоювання, мабуть, можна вважати зайвими, якщо згадати, що при використанні класичних вакцин (застосовуються вже два сотні років) в організм людини теж потрапляє, в Зокрема, ДНК патогена, яка теоретично також здатна вбудовуватися в геном. Більше того, як вважають деякі дослідники - якби ДНК-вакцини були розроблені раніше класичних, те ситуація могла б бути докорінно зворотного, і пропозиції застосовувати В«живіВ» або В«убитіВ» вакцини, як вакцини нового типа, також викликали б аналогічні і напевно справедливі побоювання. p> До переваг ДНК-вакцин, окрім вже згадуваної простоти їх отримання, виробництва і зберігання, можна віднести і те, що при введенні у організм вони як би імітують знаходження в ньому справжнього патогена, оскільки утворення білкових продуктів, виступаючих антигенами, відбувається в цьому випадку безпосередньо в клітинах людини або тварини і, отже, всі Посттрансляційні модифікації білків відбуваються у повній відповідності того, як це відбувається при справжній інфекції. Мабуть, цим можна пояснити і високий рівень імунної відповіді на ДНК-вакцини, і їх специфічність.
