омиванню її відповідним розчинником. [5]
5. Гель-хроматографія
Гель-фільтрація (синонім гель-хроматографія) - метод розділення суміші речовин з різними молекулярними масами шляхом фільтрації через різні так звані ніздрюваті гелі. [7]
Нерухомій фазою в гель-хроматографії є ​​розчинник, що знаходиться в порах гелю, а рухомий - Сам розчинник, т.е і рухому і нерухому фази становить одне і теж речовина або одна і та ж суміш речовини. Гель готують на основі, наприклад, декстрану, поліакриламіду або інших природних і синтетичних сполук. p> У відмінності від інших хроматографічних методів, що використовують відмінності в хімічних властивостях поділюваних речовин, що виявляються при їх розподілі між стаціонарною і рухомою фазами, поділ грунтується на ситова ефекті, характерному для гелів з певним радіусом пір. Розчинник (рухлива фаза) заповнює як зовнішній обсяг між зернами гелю, так і внутрішній обсяг пір. Об'єм розчинника між зернами гелю - V м називають проміжним, транспортним або мертвим об'ємом, а внутрішній об'єм пор - V п розглядається як об'єкт стаціонарної фази. Коли в колонку вводять пробу, яка містить кілька типів іонів або молекул з різними розмірами, то вони прагнуть з рухомої фази проникнути всередину пір. Таке проникнення обумовлено ентропійним розподілом, оскільки концентрація молекул поділюваних речовин в зовнішньому розчині виявляється вище, ніж у поровом просторі. Але воно стає можливим тільки в тому випадку, якщо розміри іонів або молекул менше діаметра пір. [3]
В
Рис 5 Загальний вигляд градуювальної кривої в гель-хроматографії:
1 - Область винятку, де всі молекули мають розмір більше m 2 ;
2 - Область проникнення або поділу, де розміри молекул лежать в інтервалі від m 1 і m 2 ;
3 - Область, де відбувається повне проникнення молекул з розмірами менше m 1. [3]
У процесі гель-хроматографування можуть бути відокремлені великі молекули, які гелем НЕ сорбуються, так як їх розміри перевищують розміри пір, від дрібних, які проникають в пори, а потім можуть бути елюіровать. Проводяться і більш тонкі поділу, так як розміри пір можна регулювати, змінюючи, наприклад, склад розчинника і, як наслідок, набухаемость гелю. Гель-хроматографія може бути виконана в стовпчики варіанті і в тонкошаровому.
Застосовувані на практиці гелі зазвичай поділяють на м'які, напівтверді і жорсткі. М'якими гелями є високомолекулярні органічні сполуки з незначним числом поперечних зв'язків. Фактор ємності, рівний відношенню обсягу розчинника всередині гелю до його об'єму поза гелю, у них дорівнює 3. При набуханні вони значно збільшують власний об'єм. Це сефадексе або декстранових гелі, агарочние гелі, крохмаль та ін Вони застосовуються для розділення сумішей низькомолекулярних речовин, часто в тонкошаровому варіанті. Хроматографування на м...
