інюється в перші дні. Тому потрібні були спеціальні методи обробки тканини, поживні середовища високої якості, фетальна сироватка для тривалого підтримування клітин in vitro в диплоидном стані. Диплоїдні клітини отримують з різних тканин ембріона людини (легені, нирки, шкірно-м'язова тканина, серце та ін) і тварин (нирки ембріона великої рогатої худоби, свиней,
нирки хом'яка). Диплоїдні клітини на відміну від перевіваемих мають обмежені можливості пасирування. Максимальне число пасажів 50 В± 10, потім кількість діляться клітин різко зменшується і вони гинуть. Однак диплоїдні клітини можуть бути використані протягом тривалого часу, тому що при кожному пасажі частина клітин можна заморозити (-196? В° С) і при необхідності відновити. Диплоїдні клітини мають переваги перед Перещеплювані та первинними клітинами: 10-12 днів вони можуть бути в життєздатному стані без зміни живильного середовища; при зміні середовища один раз на тиждень залишаються життєздатними протягом 4 тижнів; особливо придатні для тривалого культивування вірусів, у них збережена чутливість вихідної тканини до вірусів. Суспензійні культури клітин. У 1953р. Оуені із співробітниками показали здатність клітин розмножуватися в свободносуспендірованном стані. У наступні роки цей метод був значно вдосконалений: була створена сучасна апаратура, що забезпечує розмноження клітин зі строго заданими параметрами (температура, рН, швидкість перемішування), а також адаптовані багато лінії перевіваемих клітин до розмноження в цих умовах. Вирощування вірусів у суспензійних культурах клітин відкриває великі можливості в промисловому виробництві вакцин і діагностикумів. Однак тільки перещеплюваних клітини добре культивуються в суспензії. Новий підхід до культивування клітин в суспензії - застосування мікроносіях (сефадексе, силікагель, цітолар та ін.) На мікроносіях культивовані клітини формують моношар. Таким чином, цей спосіб дозволяє методами суспензійного культивування вирощувати залежні від прикріплення до твердого субстрату клітини: первинні,
субкультури, диплоїдні. Ці клітини прийнято називати поверхнево залежними. Спосіб культивування на мікроносіях в даний час надзвичайно популярний, оскільки він відкриває великі перспективи в клітинній біотехнології, в отриманні вакцин та інших біологічно активних речовин (інтерферон, гормони і т.д.). Зберігання культур клітин. Кожен з трьох основних типів клітинних культур - первинних культур, диплоїдних штамів і перевіваемих ліній клітин, що використовуються в вірусологічних дослідженнях, часто доводиться консервувати, так як при тривалому пасирування клітин in vitro є небезпека бактеріального забруднення і неконтрольованих (генетичних) змін самих клітин. p> Виділені ізоляти, як і штами стандартних вірусів, необхідні для порівняння і серологічних досліджень, слід зберігати в умовах, що забезпечують їм максимально тривалу життєздатність. При рН середовища 7,0-7,4 та внесення до неї певних добавок вірус можна з...
