ічні фуранози в якості цукрового залишку (див. рис. 4, VI). Вони володіють великим спорідненістю до комплементарної послідовності (температура плавлення дуплекса зростає на 6 В° С при модифікації одного нуклеотиду [17]), що є і гідністю (ефективне зв'язування мішені), і недоліком (освіта шпильок). Таке спорідненість необхідно враховувати при конструюванні LNA [18]. Дослідження на мишах показали малотоксичних LNA [19]. p align="justify"> Пептидні нуклеїнові кислоти (PNA) - аналоги нуклеїнових кислот, в яких сахарофосфатний остов замінений на псевдопептідний N-(2-аміноетил)-гліціновие полімер. N-кінець імінірует 3 -кінець олігонуклеотиду, а C-кінець - його 5 -кінець (див. рис. 3, VII). Комплекси PNA - РНК більш стабільні, ніж комплекси ДНК - ДНК і РНК - РНК. Незважаючи на те, що PNA можуть пов'язувати мішень як у антипараллельной (по Вотсону - Крику), так і в паралельній (за Хугстіну) орієнтації, більш стабільні комплекси утворюються при антипараллельной орієнтації PNA. Дослідження показали малу токсичність PNA [20].
морфоліно (див. рис. 3, VIII) - це реагенти, що суміщають стабільність, резистентність до дії нуклеаз, ефективність, активність протягом довгого періоду, водорастворимость, високу специфічність і низьку токсичність. Молекули мають нейтральний заряд [12,21]. Виробництвом морфоліно займається компанія Gene Tools, LLC ( <# "justify"> МодіфікаціяСтабільность до нуклеазамСродство до мішеніАктівація РНКази HНетоксічностьODN-+ + + S-ODN + В± +-Me-ODN + + - В± BH3-ODN + + + +2 -O-Me-ON + + + - В± LNA + + + - + PNA + + + - + Morpholino + + + - +
1.2.4 Модифікації азотистих основ
Ефективного антисмислового дії буває важко досягти тільки за рахунок модифікацій сахарофосфатнимі остова. Модифіковані азотисті основи підвищують ефективність дії антисмислових ODN за рахунок збільшення спорідненості до РНК-мішені (аміноаденозін, G-clamp) і швидкості проникнення через плазматичну мембрану (катіонні і цвіттер-іонні групи). p align="justify"> При приєднанні феноксазіна до залишку цитозину виходить так званий G-clamp (див. рис. 6, X), який утворює додаткову водневий зв'язок із залишком гуаніну, завдяки чому на 6 - 18 В° С збільшується температура плавлення гібрида ODN - РНК. Така модифікація виробляється зазвичай по 3 -кінця, що чи не порушує РНКаза H-компетентність [3,22].
При введенні аміногрупи в залишок аденіну (див. рис. 6, XI) також зростає спорідненість до мішені за рахунок утворення додаткової водневого зв'язку із залишком тиміну [23].
В
Рис. 6. Додаткові водневі зв'язки між С і G clamp (X), між T і A NH2 (XI)
з приєднаними до залишків азотистих основ катіонними і цвіттер-іонними гр...