Теми рефератів
> Реферати > Курсові роботи > Звіти з практики > Курсові проекти > Питання та відповіді > Ессе > Доклади > Учбові матеріали > Контрольні роботи > Методички > Лекції > Твори > Підручники > Статті Контакти
Реферати, твори, дипломи, практика » Курсовые обзорные » Придушення експресії гена EGFP в клітинах з використанням кон'югатів олігонуклеотиду з піреном

Реферат Придушення експресії гена EGFP в клітинах з використанням кон'югатів олігонуклеотиду з піреном





упами (наприклад, спермідіновой, рис. 7) за рахунок свого позитивного заряду не тільки володіють б ? льшим спорідненість до мішені, а й поліпшеною здатності до проникнення в клітину і стабільністю до дії нуклеаз [3].

В 

Рис. 7. Спермідіновое похідне азотистого підстави як приклад катіонної модифікації. br/>

З кінцевими азотистими підставами для візуалізації місця розташування ODN в клітці кон'югують великі флуоресцирующие ліганди, такі як флуоресцеїн [7].


XIV

Рис.8. Приєднання залишку флюоресцеина до тимін. br/>

1.2.5 Приєднання об'ємних заступників

Здатність проникати всередину клітини, минаючи клітинну мембрану, - одна з якостей, яке повинно бути присутнім у ефективного антисмислового олігонуклеотиду. Більшість описаних вище модифікацій нуклеотидів у складі ODN не роблять значного впливу на транспорт ODN через клітинну мембрану. Існує кілька шляхів проникнення молекул через плазмалемму, але для ODN важливі два: дифузний, або рецептор-опосередкований, і рецептор-опосередкований. Транспорт по першому варіанту утруднюється сумарним негативним зарядом ODN та їх гідрофільністю. Використання другого шляху обмежена недостатніми даними про поверхневих білках мембрани клітин, що відповідають за транспорт нуклеїнових кислот в клітку. Створення кон'югатів ODN з різними хімічними групами сприяє підвищенню ефективності транспорту з того чи іншого шляху в залежності від типу хімічної групи та місця її приєднання до ODN. На малюнку 9 представлені варіанти лінкерів, які використовуються при отриманні кон'югатів. Ліганди можна приєднувати до азотистим підстав, кінцевим фосфатах, фосфодіефірнимі (або аналогічним їм) зв'язках, а також залишкам цукру. Деякі типи хімічних груп дозволяють також візуалізувати компартментализацию шляхом детекції флуоресценції. модифікація олигонуклеотид антисмислового реакція


В 

Рис.9. Приклади лінкерів для приєднання лігандів. br/>

Часткова і навіть повна нейтралізація негативного заряду ODN не робить істотного ефекту на здатність ODN до мимовільного транспорту в клітку. Приєднання різних об'ємних гідрофобних лігандів, зокрема, тих, що зображені на малюнку 9, полегшує транспорт ODN через мембрану. <В 

Рис.10. Приклади ліпофільних лігандів. br/>

Добре вивчені кон'югати з холестеролом [3,4,24,25]. Механізм, який поліпшує проникнення в клітину за рахунок приєднання холестеролу, ще не до кінця зрозумілий, хоча, передбачається рецептор-опосередкований включення ліпопротеїдів [25]. Холестеролових кон'югати утворюють міцели, що полегшує їх транспорт всередину клітини. Приєднують залишок холестеролу зазвичай по кінцевим 5 - і 3-фосфатах, причому 3-монохолестерилолигонуклеотиды більш ефективні в порів...


Назад | сторінка 7 з 24 | Наступна сторінка





Схожі реферати:

  • Реферат на тему: Оптимізація методу придушення експресії гена EGFP З використанням кон'ю ...
  • Реферат на тему: Вивчення впливу наночастинок діоксиду титану на клітинну мембрану методом а ...
  • Реферат на тему: Приєднання Хакасії до Росії
  • Реферат на тему: Приєднання Сибіру до Росії
  • Реферат на тему: Приєднання Казахстану до Росії