иску (ЖХВД)
З подальшого буде ясно, що хроматографічні процеси протікають тим швидше (якою б природи де вони були), чим менше розмір гранул. Швидше встановлюється певний рівновагу між змістом фракціоніруемих молекул або іонів всередині гранул і в протікає між ними рідини - елюенті. При відповідних змінах складу елюенту швидше здійснюється В«насиченняВ» внутрішнього об'єму гранул пов'язаними молекулами речовини або, навпаки, відбувається повний вихід цих молекул з гранул у ток елюента.
У звичайній рідинної хроматографії низького тиску використовують сферичні гранули в широкому діапазоні розмірів (діаметром 20-300 мікрон). Для забезпечення необхідної швидкості протікання рідини навіть через довгі колонки з найбільш дрібними гранулами з цього діапазону досить створити перепад тиску на колонці в 3-4 атмосфери. Процес хроматографічного фракціонування при цьому займає кілька годин.
З середини 70-х років, коли відкрилися перспективи хроматографічного контролю за технологічними процесами в харчовій і фармакологічній промисловості, в інтересах прискорення такого контролю багато фірм стали пробувати переходити на розміри гранул в 10,5 і навіть 3 мкн. Однак виявилося, що для забезпечення швидкого перебігу елюенту через колонки, наповнені настільки дрібними гранулами, потрібно створювати перепад тиску в 200-300 атмосфер на колонку. Фізично це можна пояснити двома причинами. По-перше, шари вільної рідини між добре упакованими гідрофільними гранулами стають так тонкі, що починає сильно позначатися рідинне тертя в елюенті. По-друге, настільки малі гранули важко зробити сферичними і притому уникнути як значного розкиду їх діаметрів, так і засмічення проміжків між гранулами зовсім дрібними уламками. (В«ОтмучіваніемВ» в цих умовах малоефективне.)
Математично можна довести, що при заповненні якогось фіксованого обсягу (колонки) відносно малими сферичними частинками суворо однакового розміру частка вільного об'єму залишається однаковою незалежно від діаметра частинок. Але якщо вільне простір між ними забиває В«пилВ», то опір протіканню рідини через таку упаковку зростає багаторазово.
Все це не зупинило конструкторів апаратури для хроматографії. Були створені розбірні колонії з легованої стали, розраховані на такі тиску і відповідні ущільнювальні пристрої на їх вході і виході, а також для впорскування досліджуваних препаратів. З'явилися потужні плунжерні насоси з кулачковим приводом (як у клапанів автомобільного мотора). Зрозуміло, всі прилади, які стоять після колонки, на стороні атмосферного тиску (денситометри, колектори фракцій) залишилися тими ж, що для звичайної хроматографії.
Високий тиск спричинило за собою підвищені вимоги до жорсткості самих гранул. Їх стали виготовляти на основі окису кремнію (В«силікагелюВ»).
Виграш у швидкості проведення хроматографії при високому тиску очевидний. Але в лабораторних умовах, як правило, не грає істотної ролі триває хро...
