ify"> про C в дельті р.. Макензі і (-9) - (-12) про С на Колимі, число життєздатних клітин не залежить від температури мерзлих товщ. Поблизу південного кордону мерзлоти в Західного Сибіру з (t) = (-1) - (-2) про С і в Антарктиді при (t) = (-18) - (-25) про С, чисельність життєздатних мікроорганізмів падає на кілька порядків.
Режим переохолоджених і пластічномерзлих порід Західного Сибіру не забезпечує тривалої кріоконсервації біологічних систем, а в Антарктиді падіння числа життєздатних клітин пояснюється переходом більшої частини мікробного комплексу в некультівіруемих стан через вкрай низьких температур вміщають порід.
МЕТОДИ ДОСЛІДЖЕННЯ арктичного МІКРОФЛОРИ
З отриманого шляхом буріння мерзлого непорушеного керна діаметром 50-100 мм відбирають центральну частину з дотриманням умов асептики. Роботу з керном проводять в польовому боксі, керн зачищають стерильним скальпелем, поверхню обробляють 95%-м етиловим спиртом і поміщають в стерильні алюмінієві бюкси або пакети. p align="justify"> У полі проби зберігають у свердловині- морозильнику при температурі їх природного залягання -8 ... -10 В° С. Наприкінці польового сезону зразки в термостатах з кріосмесью у замерзлому стані доставляють у лабораторію.
Зразки похованих грунтів і матеріал нір копалин гризунів відбирають зі свіжих мерзлих стінок оголень. Стінки зачищають до шару, не порушеного відтаюванням, потім в мерзлій породі вирубують нішу глибиною 30-40 см, з якої відбирають зразки, обробляють їх 95%-м етиловим спиртом, поміщають в стерильний пакет і зберігають у замерзлому стані. У лабораторії зразки зберігаються у морозильних камерах при температурі -20 В° С.
Для виділення життєздатних найпростіших з многолетнемерзлих відкладень використовують метод накопичувального культивування. Мерзлі зразки (1-2 г) поміщають у стерильні чашки Петрі з середовищем Прескотта і Джеймса (Cerophyl-Prescott infusion): CaCl2 х 2H2O - 0,433 г, KCl - 0,162 г, K2HPO4 -0,512 г, MgSO4 х 7H2O - 0,28 г і культивують при температурі 5 і 20 В° С протягом 4 місяців.
Для запобігання від висихання і зараження чашки обертають парафілмом. Спостереження в накопичувальних культурах проводять в закритих чашках Петрі з використанням інвертованого мікроскопа, а також на стеклах обростання - стерильних покривних стеклах, поміщених в накопичувальну культуру.
При виявленні найпростіших зразок висівають повторно. Всі маніпуляції зі зразками грунту і висів проб в чашки Петрі здійснюють в мікробіологічному ...