ign="justify"> в) Реакція плазмокоагуляции. Розведену плазму кролика в обсязі 0,5 мл вносимо в стерильну пробірку і в ній суспендованих одну петлю агаровой добової культури. Інкубують при 37 градусах. Реєстрували результати через 1, 2, 4, 18 годин інкубації. При появі в перші 4:00 інкубації на дні пробірки драглистоподібного згустку, результат вважали позитивним. При відсутність плазмогоагуляціі протягом 18 годин - негативним. При наявності позитивного результату в реакції плазмокоагуляции і хоча б одного з двох попередніх тестів досліджуваний штам відносили до виду S.aureus. Якщо штами після виконаних досліджень не відносили до золотистого стафілококу, то проводили подальшу ідентифікацію.
г) Тест на фосфатазу. Добові агарові культури досліджуваних штамів сіяли на середу для визначення фосфатази бляшками. Інкубують при 37 градусах 18-24 години. Результати реєструють через добу. По закінченню інкубації на кришку чашки Петрі наливають 5-6 крапель 25% розчину аміаку, витримують 5-10 хвилин, після чого реєструють результати. Про позитивної реакції свідчить поява рожевого забарвлення навколо макроколоній. S epidermidis виділяє фосфатазу і не окисляє маніт. Якщо отримані протилежні результати, то виділена культура є S. saprophyticus.
. 4.2 Ідентифікація бактерій родини Enterobacteriaceae
Вивчення колоній первинних посівів патологічного матеріалу починали на чашках із середовищем Ендо. Підозрілі колонії знімали бактеріологічною петлею і засівали уколом в стовпчик середовища Олькеницького. Після двадцять четвертого інкубації при температурі 37 градусів давали попередній висновок про родової приналежності виділених культур і визначали набір додаткових тестів для ідентифікації. На поверхні середовища Олькеницького спостерігався вологий однорідний зростання без пігментообразованія. По зміні забарвлення стовпчика середовища враховували здатність ферментувати глюкозу, а по зміні забарвлення скошеної частини - ферментувати лактозу. Додатковими тестами для визначення родової приналежності є.
а) Визначення рухливості. Спостерігали після інкубації досліджуваної культури в напіврідкої середовищі Кларка. При зростанні мікроорганізмів по ходу уколу судили про відсутність рухливості.
б) Використання цитрату. Виробляли посів вісімнадцяте культури на середу Сіммонса. Інкубували при температурі 37 градусів 18-20 годин. Зростання культури і зміни фарбування середовища в синій колір свідчать про позитивну реакцію.
в) Визначення декарбоксилаз амінокислот. Посів проводили мінімальними дозами зі скошеного агару з 16-18 годинний культурою в середу з амінокислотами (лізин, орнітин, аргінін) і контрольну середу. Після посіву вносили стерильне вазелінове масло, інкубували при температурі 37 градусів 24 години. Потім додавали 4-5 крапель 10% розчину хлориду заліза (3). Поява інтенсивної зеленого забарвлення свідчить про позитивну реакцію.
. 4.3 Ідентифікація бактерій роду Pseudomonas
Найбільше значення для медицини представляють види P. aeruginosa, P. putida, P. cepacia, P. fluorescens, які є збудниками різних гнійно-септичних уражень і часто мають госпітальний характер. Особливістю більшості псевдомонад є позитивний тест на освіту цитохромоксидази, а також утворення різних пігментів. Всі види, що входять в даний рід, каталазопозитивні, не виділяють індол, не реагують з метиловим червоним і не утворюють ацетілметілкарбінола. Хід дослідження:
Перший день. Виробляли посів на живильні середовища і інкубували при температурі 37 градусів протягом 18-24 годин.
Другий день. Відзначали зростання і виділяли колонії, що підлягають дослідженню. Розрізняють п'ять морфологічних типів колоній:
плоскі колонії неправильної форми;
колонії, що нагадують кишкову паличку;
складчасті (так звані «квітки маргаритки»);
слизові, рідко дають пігментацію при первинному виділенні;
карликові, які з'являються тільки через 18 годин.
На кров'яному агарі навколо колоній видно зони гемолізу. Часто металевий наліт і зона лізису. На середовищі ендо блідо-рожеві колонії невеликих розмірів. Культури синьогнійної палички утворюють пігменти. Одні з них - піоціанін, що дає синю або синьо-зелене забарвлення. Інший флюоресцерін, що дає зеленувато-жовте забарвлення, флюоресцирующєє в прохідному світлі в УФ-променях. Піоціанін утворюють тільки штами синьогнійної палички.
Підозрілі колонії досліджували на здатність утворювати цитохромоксидазу, використовуючи індикаторні папірці СІБ. Безпігментні колонії, що дали позитивний цітохромоксідазной тест, відбирали і суспендованих в 0,5 мл фізіологічного ...
