ріант прямої фази) і на неполярному сорбенті з використанням полярного елюенту - так звана обернено-фазова високоефективна рідинна хроматографія (ОфВЖХ).
При переході елюенту до елюентом рівновагу в умовах ОфВЖХ встановлюється у багато разів швидше, ніж в умовах полярних сорбентів і наведених ПФ. Внаслідок цього, а також зручності роботи з водними і водно-спиртовими елюентом, ОфВЖХ отримала в даний час велику популярність. Більшість аналізів за допомогою ВЖХ проводять саме цим методом. p> Апаратура для ВЖХ
Колонки для ВЖХ виконують з нержавіючої сталі з внутрішнім діаметром 2-6 мм і довжиною 10-25 см. Колонки заповнюють сорбентом (НФ). У Як НФ використовуються силікагель, оксид алюмінію або модифіковані сорбенти. Модифікують зазвичай силікагель, впроваджуючи хімічним шляхом в його поверхню різні функціональні групи.
Детектори. Реєстрація виходу з колонки окремого компонента проводиться за допомогою детектора. Для реєстрації можна використовувати зміну будь-якого аналітичного сигналу, що йде від рухомої фази і пов'язаного з природою і кількістю компонента суміші. У рідинної хроматографії використовують такі аналітичні сигнали, як светопоглощение або светоіспусканіе що виходить розчину (фотометричні і флуоріметріческой детектори), показник заломлення (Рефрактометричні детектори), потенціал і електрична провідність (електрохімічні детектори) та ін
Безперервно детектується сигнал реєструється самописцем. Хроматограмма являє собою зафіксовану на стрічці самописця послідовність сигналів детектора, що виробляються при виході з колонки окремих компонентів суміші. У разі поділу суміші на зовнішній хроматограмме видно окремі піки. Положення піка на хроматограмі використовують для цілей ідентифікації речовини, висоту або площа піку - для цілей кількісного визначення.
Якісний аналіз
Найважливіші характеристики хроматограми - час утримування t r і пов'язаний з нею утримуваний об'єм - відображають природу речовин, їх здатність до сорбції на матеріалі нерухомої фази і, отже, при сталості умов хроматографування є засобом ідентифікації речовини. Для даної колонки з певними швидкістю потоку і температурою час утримування кожного з'єднання постійно (рис), де t R (a) - час утримування компонента А аналізованої суміші з моменту введення в колонку до появи на виході з колонки максимуму піку, t R (BC) - Час утримування внутрішнього стандарту (спочатку відсутнє в аналізованої суміші речовина), h - висота піку (мм), a 1/2 - ширина піка на половині його висоти, мм.
Для ідентифікації речовини за хроматограмі зазвичай використовують стандартні зразки або чисті речовини. Порівнюють час утримування невідомого компонента t Rx з часом утримування t RCT відомих речовин. Але надійніша ідентифікація з вимірювання відносного часом утримування
При цьому в колонку спочатку вводять відоме реч...
