овина (внутрішній стандарт) і вимірюють час його утримування t R (BC) , потім хроматографически поділяють (хроматографіруют) досліджувану суміш, в яку попередньо додають внутрішній стандарт. p>
Кількісний аналіз В основі цього аналізу лежить залежність висоти піку h або його площі S від кількості речовини. Для вузьких піків переважніше вимір h, для широких розмитих - S. Площа піку вимірюють різними способами: множенням висоти піка (h) на його ширину (а 1/2 ), виміряну на половині його висоти; планіметрірованіем; за допомогою інтегратора. Електричними або електронними інтеграторами забезпечені сучасні хроматографи. p> Для визначення вмісту речовин в пробі використовують в основному три методи: метод абсолютної градуювання, метод внутрішньої нормалізації і метод внутрішнього стандарту.
Метод абсолютної градуювання заснований на попередньому визначенні залежності між кількістю введеного речовини і площею або висотою піка на хроматограмі. У хроматограму вводять відоме кількість градуювальної суміші та визначають площі або висота отриманих піків. Будують графік Залежно площі або висоти піка від кількості введеної речовини. Аналізують досліджуваний зразок, вимірюють площу або висоту піку визначуваного компонента і на підставі градіровочного графіка розраховують його кількість.
Метод внутрішньої нормалізації заснований на приведенні до 100% суми площ всіх піків на хроматограмі. p> Цей метод дає інформацію тільки про відносному змісті компонента в суміші, але не дозволяє визначити його абсолютну величину.
Метод внутрішнього стандарту заснований на порівнянні обраного параметра піку аналізованого речовини з тим же параметром стандартного речовини, введеного в пробу у відомій кількості. У досліджувану пробу вводять відоме кількість такого стандартного речовини, пік якого досить добре відділяється від піків компонентів досліджуваної суміші. p> В останніх двох методах потрібне введення поправочних коефіцієнтів, що характеризують чутливість використовуваних детекторів до аналізованих речовин. Для різних типів детекторів і різних речовин коефіцієнт чутливості визначається експериментально.
У рідинної адсорбційної хроматографії використовується також аналіз фракцій розчинів, зібраних в момент виходу речовини з колонки. Аналіз може бути проведений різними фізико-хімічними методами. p> рідинних адсорбційну хроматографію застосовують в першу чергу для розділення органічних речовин. Цим методом вельми успішно вивчають склад нафти, вуглеводнів, ефективно розділяють - транс-і цис-ізомери, алкалоїди та ін За допомогою ВЖХ можна визначати барвники, органічні кислоти, амінокислоти, цукру, домішки пестицидів і гербіцидів, лікарських речовин та інших забруднювачів у харчових продуктах.
Апаратура для рідинної хроматографії.
У сучасній рідинної хроматографії використовують прилади різного ступеня складності - від найбільш простих систем, до хроматографів висок...
