приклад октадецилдиметилхлорсилана, в умовах, що забезпечують найбільш повне протікання реакції з силанольними групами. Після закінчення щеплення проводять В«Енд КеппінгенВ», тобто обробку триметилхлорсиланом для остаточного усунення доступних силанольних груп на поверхні сорбенту. Нарешті, сорбент повинен бути повністю відмитий після закінчення реакції від усіх залишків використовувалися рактівов і побічних продуктів реакції.
Кожному хроматографісту доводиться вирішувати, який же з доступних для нього звернення-фазних сорбентів є найбільш наближається до ідеального. При цьому йому наводиться користуватися даними фірми про розмір пор (середньому) У їх кривої розподілу, про обсяг пір, поверхні сорбенту, прищеплює агента, наявності або відсутності додаткової обробки (В«енд кеппінгаВ»). Ці дані, як правило, неповні і не містять багатьох важливих відомостей, що стосуються технології і великою мірою визначають якість сорбенту. крім того, багато дані носять рекламний характер.
Силікагель, використовуваний як матриця для подальшої щеплення нерухомої фази, грає найважливішу роль в визначенні кінцевих властивостей одержуваного сорбенту. Він має просторово-пористу структуру, утворену діоксидом кремнію в процесі освіти золю, гелю і подальшої його сушіння з видаленням фізично сорбированной води. Залежно від умов формування силікагелю можуть бути отримані зразки з середніми розмірами пор від 3 до 10 нм. За рахунок подальшої гідротермальної обробки силікагелю може бути досягнуто значне збільшення розміру пор (до 20-50 нм і більше) при збереженні в основному обсягу пір. Методами формування микросферических сорбентів для ВЕРХ з Тетраетоксісилан за рахунок варіювання умов формування і затвердіння, вибору розчинників і т.п. вдається домогтися отримання силікагелю з досить високою пористістю (вільний об'єм пір 0,7-1,2 мл/л) і порами від 5 до 400 нм і більше.
Яку ж сілікагелевой матрицю використовувати для щеплення нерухомої фази? Слід враховувати ряд важливих обставин. Якщо використовувати матрицю з порами 3-5 нм, розмір таких пір порівняємо з довжиною ланцюга октадецілсілана (близько 1 нм). Якщо припустити щільну щеплення до такого сорбенту октадецілсіланових груп, стає очевидним, що вузькі пори зменшаться в діаметрі дуже значно (деякі навіть взагалі закриються) і стануть недоступними для потрапляння в них великих аналізованих молекул. Це може внести істотний внесок у зміну утримування і порядку виходу компонентів. Якщо спочатку для щеплення використовували силикагели з розмірами пір 5-6 нм, то в подальшому перейшли до порам близько 10 нм, а зараз вважають більш доцільним навіть 15-30 нм. Це пов'язано з усе зростаючим використанням щеплених сорбентів для аналізу р великих за молекулярною масою біополімерів, таких, як білки, поліпептиди та ін
Крім розміру пір, велику роль відіграє обсяг пір силікагелю і його поверхню. Якщо зростання поверхні дає збільшення кількості силанольних груп (їх щільність близько...
