Північний Державний Медичний Університет
Кафедра сімейної медицини
Реферат на тему: В«ПЛР - діагностикаВ»
Зав.каф.: професор В.В. Попов
Зав.курсом клінічної
лабораторної діагностики:
професор Н.А. Воробйова
Виконала: лікар-інтерн
МУЗ В«Міська лікарня № 1В»
р. Северодвінську
Н.Ю. Шульгіна
Архангельськ 2009
Зміст
Введення
Вивчення ДНК: будова, структура ДНК
Основний принцип ПЛР
Здійснення рутинних методик ПЛР
Типові помилки при діагностиці методом ПЛР
Переваги методу ПЛР як методу діагностики інфекційних захворювань
Обмеження методу ПЛР
Основні принципи організації ПЛР - діагностичних лабораторій і
вимоги до проведення ПЛР - аналізу
Висновок
Список використаної літератури
Введення
ДНК-діагностика - Це один з найбільш сучасних високотехнологічних методів дослідження. ДНК-аналізи широко застосовуються в діагностиці інфекційних захворювань, дозволяючи виявляти навіть поодинокі мікроорганізми в організмі людини.
ДНК-діагностика об'єднує кілька методів дослідження, найпоширеніший з них - метод ПЛР (полімеразної ланцюгової реакції, Polymerase chain reaction, PCR diagnostics).
На сьогоднішній день ПЛР-аналіз є однією з найбільш поширених і динамічно розвиваються технологій лабораторної діагностики. Щорічно на ринку з'являється все більше тест-систем, призначених для виявлення як збудників різних захворювань, так і мутацій генів людини, тварин і рослин. Кількість ПЛР-лабораторій неухильно збільшується, а ПЛР-аналіз стає все більш затребуваним серед фахівців і пацієнтів. p> Спочатку сам принцип методу полімеразної ланцюгової реакції (ПЛР) був розроблений Кері Мюлліса в 1983р. Відкриття ПЛР стало одним з найбільш видатних подій в галузі молекулярної біології за останні 20 років, і за розробку ПЛР-аналізу Керрі Мюлліса вже в 1993 р. був удостоєний Нобелівської премії в галузі хімії. p> Появі методу проведення полімеразної ланцюгової реакції передували певні досягнення молекулярної генетики: до того часу вже були розшифровані нуклеотидноїпослідовності геномів ряду мікроорганізмів і виділені специфічні.
Також появі ПЛР багато сприяло відкриття унікального ферменту ДНК-полімерази (Або taq-полімерази). Саме цей фермент каталізує і "контролює" всі процеси під час проведення аналізу методом ПЛР. Особливість цього ферменту - він термостабілен, виключно термостійкий: він витримує нагрівання до температури кипіння без втрати активності, а "улюблений" його температурний режим під час роботи - 72 В° С. Багато реакції при проведенні ПЛР йдуть майже виключно при підвищеній температурі.
Офіційне становлення методу ПЛР в Росії пов'язано з виходом в 1995 р. двох мето...
