СПЕЦІАЛЬНІ ВАРІАНТИ високоефективного Рідинний хроматограф
Препаративна ВЕРХ
До теперішнього часу не створений єдиний варіант методу препаративної ВЕРХ, який володів би як великий швидкістю та ефективністю поділу, так і високою продуктивністю і економічністю. Тому запропоновані варіанти методу, значно розрізняються за розмірами та ефективності колонок, по продуктивності роботи, вимогам до обладнання і витратам на обладнання, сорбенти і розчинники. При виборі оптимального варіанту препаративної ВЕРХ для кожного конкретного завдання. Досліднику доводиться стикатися з низкою труднощів і проблем.
Першою і основною трудністю є висока вартість вузько сепаратистські сорбентів, особливо щеплених, з розміром частинок від 5 до 20 мкм. Якщо з цим можна миритися для аналітичних колонок діаметром 2-5 мм, то вартість різко зростає при використанні колонок діаметром 10, 20 або 40 мм і може скласти відповідно 200, 800 і 3200 рублів (без урахування вартості металевих колонок і роботи з їх заповнення). Крім того, такі колонки досить непросто заповнювати суспензійним способом.
Друга складність-створення хроматографів, насоси яких могли б подавати розчинник при тисках 5-20 МПа при витраті 5-100 мл/хв, а інжектори дозволяли б водити без розмивання проби об'ємом 0,5-10 мл. Для таких насосів необхідні досить потужні, дорогі і важкі електродвигуни, складні і дорогі ущільнення, клапани і т.д.
Третя складність-необхідність витрачання великих обсягів розчинників високої чистоти, що призводить до великим затратам праці і часу на їх регенерацію і очищення або до великих витрат на їх придбання. Витрата розчинника досягає 10 л і більше на 1 г препаративно виділеного очищеного продукту.
Нарешті, існують проблеми, пов'язані з обмеженою розчинністю зразка в розчиннику, підвищеної в'язкістю концентрованих розчинів, вибухо-і пожежонебезпекою роботи, необхідністю видалення великих обсягів розчинників під вакуумом і т.д.
Звичайно, всі ці труднощі зростають у міру зростання масштабу роботи і кількості речовини, яка потрібно препаративно виділити або очистити. Звідси перше правило: масштаб препаратівного поділу повинен бути малий настільки, наскільки дозволяють поставлені завдання.
Багато проблем, пов'язаних з виділенням 1-10 мг чистих речовин для їх ідентифікації сучасними високочутливими фізико-хімічними методами легко вирішуються на звичайних аналітичних колонках діаметром 4-5 мм шляхом багаторазового введення проб і збору фракцій. Як правило, для таких робіт не потрібно ніякого спеціального обладнання, крім звичайного аналітичного хроматографа, а збір фракцій здійснюється вручну. Продуктивність роботи можна збільшити без істотної зміни апаратури, замінивши аналітичну колонку на препаративну діаметром 10-14 мм: як правило, насоси здатні подавати до 5-10 мл/хв розчинника, а інжектори-вводити 0,1-1 мл проби. Правда, вартість обладнан...
