Е.А. Ліпунова, М.Ю. Скоркіна
Бєлгородський державний університет
Викладено оригінальний спосіб визначення функціональної активності кісткового мозку (еритроцитарного балансу) у птахів у фізіологічних умовах, що може бути використаний в якості інтегрального тесту при оцінці адаптаційних резервів системи ерітрона в умовах дії екстремальних факторів. Це дозволяє використовувати пропонований спосіб в гематології та екології тварин. Спосіб технічно простий, економічний і відрізняється високою відтворюваністю.
Введення
В даний час розроблені надійні методи визначення окремих періодів і всього генераційні циклу клітин [1, 4, 6]. Особливий інтерес представляє кількісна характеристика резерву еритроцитів, можливість його мобілізації при різних станах організму. Сучасна методика підрахунку костномозговой продукції еритроцитів, розроблена Є.М. Мосягін [3, 4] і вдосконалена А.В. Ілюхіним і співавт. [1], заснована на визначенні тривалості життя еритроцитів за змістом ретикулоцитів до і після інкубації проби крові за певний проміжок часу, оскільки рівновага системи ерітрона в нормі обумовлено двома факторами: природною смертю еритроцитів і їх костномозговой продукцією [6].
Метод не отримав широкого поширення зважаючи недостатньої його опрацьованості, високою варіабельності і не завжди фізіологічно обгрунтованих відмінностей цифрових даних, що відображають концентрації ретикулоцитів, визначених при різних способах їх забарвлення. Крім того, аналіз літературних джерел показав досить рідкісну застосовність методу при дослідженні активності еритропоезу у птахів і нижчих хребетних і, як наслідок, слабку вивченість означеного питання у цих груп тварин. Застосування загальноприйнятого способу оцінки інтенсивності еритропоезу у інших систематичних груп тварин не представляється можливим зважаючи фізіологоморфологіческіх і біохімічних особливостей еритроїдного паростка кровотворення, а саме - різної швидкості дозрівання, високого разновозрастного поліморфізму клітин в периферичному руслі і збереження ядер у зрілих форм.
У зв'язку з цим завданням дослідження з'явилися удосконалення способу виявлення ретикулоцитів і їх вікової класифікації для функціональної діагностики системи червоної крові за даними підрахунку інкубованих ретикулоцитів птахів у фізіологічних умовах.
Матеріали і методи дослідження
Об'єктом дослідження служила кров, отримана з подкрильцовой вени у здорових статевозрілих птахів кросу «Іза Браун». В якості антикоагулянту використовували 3,8% цитрат натрію, 0,1 мл якого змішували з 0,4 мл крові. Кров з антикоагулянтом інкубували протягом 4 год [2] в біологічному термостаті при 39 ° С. Після закінчення часу інкубації в пробірку відбирали 0,3 мл крові і додавали 0,1 мл 1% розчину брильянтового крезілового синього, приготованого на фізіологічному розчині (0,9% NaCl), тривалість фарбування при кімнатній температурі склала 40 хв. Потім на чистих знежирених стеклах готували мазки, які фіксували в метанолі, висушували на повітрі і мікроскопіровать під іммерсіей. Підрахунок ретикулоцитів виробляли за ступенем їх зрілості на 1000 еритроцитів, використовуючи аналізатор зображень «Відео-Тест-Мастер-Морфологія» з програмним забезпеченням [5]. Діагностику функціонального стану системи червоної крові виробляли за показниками еритроцитарного балансу, які розраховували за формулами, запр...
