Сучасні методи діагностики інфекційних хвороб
Методи діагностики інфекційних хвороб тварин
До інфекційних відносять захворювання, збудниками яких є паразити рослинного походження (бактерії, бацили, фильтрующиеся віруси).
Для правильного визначення хвороби нерідко потрібна провести цілу систему діагностичних досліджень (прижиттєвих і посмертних). Прижиттєвий метод включає в себе епізоотологічне обстеження господарства, клінічне обстеження хворої тварини, а також лабораторне дослідження матеріалу, отриманого від хворої тварини.
епізоотологічне обстеження грунтується на ретельному аналізі епізоотологіческой обстановки господарства чи району. При цьому враховують статистичні та звітні дані, що характеризують ветеринарне стан господарства за попередні роки, проводять обстеження санітарного та зоогигиенического стану господарства та тваринницьких ферм з урахуванням умов утримання тварин, якість догляду за ними, годування, походження кормів, їх якості та режиму використання, якості води і порядку водопою. Визначають кількість хворих і сприйнятливих до захворювання тварин. Встановлюють можливі джерела та шляхи поширення інфекції в господарстві і дозволяють ряд інших питань.
Імунологічна діагностика інфекційних захворювань заснована на виявленні антитіл в організмі пацієнта до збудника інфекції методами серологічних досліджень. В основі всіх серологічних реакцій лежить взаємодія антигена і антитіла з утворенням імунних комплексів, які можна виявити в тестах in vitro.
Імуноферментний аналіз (ІФА)
У методах імуноферментного аналізу використовують іммунореагенти, мічені ферментами. Найбільш широко використовується твердофазний ІФА. Як твердої фази використовують полістиролові або полівінілові планшети або кульки, на яких адсорбовані антигени або антитіла. Для виявлення антитіл відомий антиген адсорбують в лунках полистироловой пластини. Потім вносять досліджувану сироватку, в якій хочуть виявити антитіла до даного антигену.
Після інкубації лунки промивають для видалення незв'язаних білків і вносять у них антііммуноглобуліновие антитіла, мічені ферментом. Після інкубації та відмивання в лунки додають специфічний для ферменту субстрат і хромоген для реєстрації кінцевих продуктів розщеплення субстрату. Про наявність і кількість антитіл судять по зміні кольору і інтенсивності забарвлення розчину. Методи ІФА мають високу чутливість і специфічністю і отримали найбільш широке поширення серед імунологічних методів клініко-лабораторної діагностики.
Полімеразна ланцюгова реакція (ПЛР)
ПЛР - це метод множення числа копій нуклеїнових кислот (ампліфікація) in vitro. Перед проведенням реакції з біологічного матеріалу виділяють ДНК або РНК збудника інфекційного захворювання або ДНК генома клітин людини або тварини. Полімеразна ланцюгова реакція проводиться з використанням двох або більше олігонуклеотидних праймерів («затравки»), фланкуючих ділянка ДНК (РНК), специфічний для обумовленого ділянки геному. Процес ампліфікації полягає в повторюваних циклах температурної денатурації ДНК, відпалу праймерів з комплемен...
