вірусної частинки проникати в клітку-господаря, і, по-друге, за здатність вірусних частинок виходити з клітки після розмноження. Нуклеопротеїд (також званий S-антигеном) постійний по своїй структурі і визначає тип вірусу (А, В або С). Поверхневі антигени (гемаглютинін і нейрамінідазу - V-антигени), навпаки, мінливі і визначають різні штами одного типу вірусу.
. 4 Антигени високопатогенного грипу птахів
Віруси грипу мають два антигену - S і V. S-антиген, або комплементсвязивающім розчинний антиген, являє собою нуклеокапсид вірусу і за хімічним складом є нуклеопротеида [19].
У складі вірусної частинки є інший антиген - гемаглютинін, або V - антиген. За хімічним складом це ліпомукопротеід. Распологается в зовнішній оболонці вірусу. Щоб розділити S і V - антигени, вдаються до наступного методом, розробленим Lief і Helne в 1956 році [19, 20].
Успіхи досягнуті в молекулярної біології за останні 20 років, багато в чому обумовлені дослідженнями в галузі хімії і фізики вірусів. Однак очищення більшості вірусів тварин до середини 50-х років являла значну проблему [21].
У 1947 р Кокс із співробітниками успішно застосували для концентрування вірусу грипу метод преципітації метанолом. У 1949 р Bradford M. з співр. випадково встановили, що протамінсульфат облягає з віруссодержащей суспензії середні і великі віруси. Утворився комплекс Віру з білком потім легко діссоціруется в 1М NaCL [22, 23].
Фримель Х.В. в 1987 р показав, що вірус грипу осідає лужними білками типу папаїну і клупеіна у вигляді інфекційного комплексу, який діссоцірует в сольовому середовищі з востановлением первоночальной інфекційної активності [24].
Методом ультрофільтраціі користується для ізуеніе вірусів більше 60 років. У 1931 р А.С. Гринин та ін. Створили більш досконалі, точно калібровані ультрофільтри і визначили величину багатьох вірусів. Ці рание дослідження в той час були дуже цінними при вивченні властивостей вірусів [23]. В.І. Товарнецкій і Г.П. Глухарьов в 1937 р для очищення і концентрування Вирс грипу використовували також - ультрофільтрацію (з журналу Зап. Вірусологія.) [25]. А в 1967 р для цих цілей Уолліс Мельник застосували мембранні мілліпоровскіе фільтри [25].
Найпоширеніший метод очищення і концентрування вірусів це ультроцентріфугірованіе. Агравал і Брунінг проводили визначення щільності вірусу грипу рівноважним зональним центрифугуванням в сахарозному градієнті 30-75% (вага/об) протягом 23 і 46 годин при 100000 g. В обох випадках утворився 1 пік з щільністю 1,20 г/мл. [23].
У 1941 р Солк застосував метод адсорбції і елюції на фосфаті кальцію для концентрування. Процес адсорбції вірусу грипу на еритроцитах був детально вивчений М.В. Соколової [26] в 1949, Т.В. Єремєєв та О.М. Чалкіна вдосконалили цей метод, іспользоав для цих цілей формалінізірованную ерітроціти.P. в 1954р. використовував для очищення вірусу грипу метод хромотографии на фосфаті кальцію [27].
Наприкінці 1966 Іванова Г.А. та ін. запропонували простий метод часткового очищення вірусу діалізом віруссодержащей суспензії проти 0,001 М фосфатного буфера при рН 5,5. При цій процедурі вихід вірусу состовляет 96% при його 20-кратної очищенні [28].
За даними Т.А. Сатиной і А.П. Простякова [85], осадження вірусу 20% етанолом викликало втрату інфекційності вірусу, в той час як при осадженні 20% метанолом отримували концентрований препарат, очищений на 99%, із збереженням її інфекційності. Метод спиртової преципітації успішно застосували при концентрування та очищення вірусу грипу птахів.
Букринський А.Г. [42] проводила порівняльну очистку вірусів грипу за допомогою депротенізаціі фторуглеродах. Очищення вірусу грипу фреоном - 113 давав кращий результат у порівнянні методом адсорбції та елюції [29].
. 5 Клінічні ознаки і патологоанатомічні зміни
Інкубаційний період хвороби - 21 день. Найбільш чутливі індички і кури, крім того, хворіють фазани, японські перепели, домашні та дикі водоплавні птахи. Високопатогенний вірус грипу птахів вражає все поголів'я птиці в пташниках, з подальшою 100% смертністю протягом 48-96 годин.
У разі загибелі птиці за 48 годин повністю відсутня будь-яка клинич?? ська картина і патологоанатомічні зміни в органах і тканинах загиблої птиці, що ускладнює встановити істинні причини масової загибелі птиці.
При більш тривалому періоді перебігу захворювання 96 годин, спостерігається характерні клінічні ознаки: депресії, відмова від корму і споживання води. Відзначається синюшність слизових оболонок, гребеня і сережок, а в деяких випадках некроз частин гребеня і сережок, спостерігаються оз...
