p align="justify"> Г? детекція порушення регенераторною здатності кісткового мозку при дефіциті заліза, вітамінів B12, B6, фолатів, міді та моніторингу відповідної терапії;
Г? оцінка реакції на терапію еритропоетином, ерітросупрессорамі.
Підготовка до аналізу
В· Кров на дослідження рекомендується здавати натщесерце, пити можна тільки воду.
В· Після останнього прийому їжі повинно пройти не менше 8 годин.
В· Взяття крові на дослідження необхідно проводити до початку прийому лікарських препаратів (якщо це можливо) або не раніше ніж через 1-2 тижні після їх відміни.
В· За день до взяття крові обмежити жирну і смажену їжу, не приймати алкоголь, виключити важкі фізичні навантаження.
Фактори, що впливають на результати аналізу
В· Недостатнє перемішування крові з антикоагулянтом або неправильний вибір антикоагулянту.
В· Переливання крові незадовго до аналізу.
В· Гемоліз проби крові.
В· Прийом різних лікарських препаратів (кортикотропін, сульфаніламіди, протималярійні препарати, леводопа, азатіоприн, нестероїдні анальгетики, хлорамфенікол, метотрексат, фолієва кислота, вітамін В12, препарати заліза, еритропоетин ).
Забір крові роблять у пробірку з ЕДТА, можна переміщати, але з струшувати.
Забарвлення
Особливість забарвлення ретикулоцитів <# "justify"> 1. Насичений розчин діамантового крезілового синього в абсолютному спирті (для приготування абсолютного спирту треба витримати 96% етанол в декількох змінах прокаленного порошку мідного купоросу). На 100 мл абсолютного спирту беруть 1,2 г фарби.
+2. Розчин Азура I: АЗУР I - 1 г, амонію оксалат - 0,4 г, натрію хлорид - 0,8 г, етиловий спирт 96% - 10 мл, дистильована вода - 90 мл. Розчин фарби в закритому флаконі поміщають на 2 - 3 дні у термостат при 37 В° C і періодично енергійно збовтують. Потім охолоджують до кімнатної температури і фільтрують через паперовий фільтр. Розчин зберігають в посуді з темного скла. При появі осаду фарбу слід знову профільтрувати.
. Розчин Азура II: АЗУР II - 1 г, натрію цитрат - 5 г, натрію хлорид 0,4 г, дистильована вода - 45 мл. Розчин залишають у термостат при 37 В° C на 2 діб, періодично помішуючи. Для прискорення розчинення фарбу можна прогріти на слабкому вогні протягом 15 - 20 хв, не доводячи до кипіння. Охолоджують до кімнатної температури і фільтрують. Зберігають у посуді з темного скла.
Спеціальне обладнання
Мікроскоп.
Хід визначення
Забарвлення ретикулоцитів проводять або на склі, або в пробірці.
Забарвлення ретикулоцитів в пробірці
Забарвлення ретикулоцитів в пробірці відрізняється при використанні різних барвників.
Метод 1 - забарвлення ретикулоцитів в пробірці діамантовим крезіловим синім.
Перед вживанням готують в пробірці робочий розчин діамантового крезілового синього з розрахунку на краплю 1% розчину оксалату калію 4 краплі розчину фарби діамантового крезілового синього. У фарбу додають 0,04 мл крові (дві піпетки до позначки 0,02). Суміш ретельно, але обережно перемішують і залишають на 30 хвилин. Потім знову перемішують і готують тонкі мазки. p align="justify"> Метод 2 - забарвлення ретикулоцитів в пробірці азуром II.
У пробірку поміщають 0,05 мл розчину фарби АЗУР II і 0,2 мл крові. Суміш ретельно перемішують і залишають на 20 - 30 хвилин. Знову перемішують і готують тонкі мазки. p align="justify"> Метод 3 - забарвлення ретикулоцитів в пробірці азуром I.
У пробірку поміщають 0,3 - 0,5 мл розчину фарби АЗУР I та 5 - 6 крапель крові піпеткою від апарату Панченкова. Пробірку закривають гумовою пробкою, суміш ретельно, але обережно перемішують і залишають на 1 - 1,5 години (ретикулоцити забарвлюються краще при експозиції 1,5 - 3 години). Перемішують і готують тонкі мазки. p align="justify"> В даний час у продажу є готові барвники для ретикулоцитів заводського виготовлення. Забарвлення ретикулоцитів з їх допомогою проводиться згідно інструкції, що додається. p align="justify"> Забарвлення ретикулоцитів на склі
Метод 1 - забарвлення метиленовим синім.
