Хроматограмма суміші ароматичних вуглеводнів, отримана на колонці розміром 250х4, 6 мм з зорбаксом ОДС (6 мкм), рухома фаза - метанол - вода (90:10 за об'ємом), витрата 1,5 мл/хв, детектор УФ (254 нм), проба 20 мкл: 1 - толуол, 2 - про -ксилол; 3 - трет -бутілбензол; 4 - n-трет -бутілтолуол; 5 - n-трет -аміл-толуол; 6 - n-трет -гексілтолуол; 7 - 3,5-ді- трет -бутілтолуол; 8 - трет -гексил-о-ксилол В
Рис. 8. Хроматограмма натуральної кави, отримана на колонці розміром 150х4, 6 мм з нуклеосілом С8 (5 мкм), рухома фаза - метанол - 0,01 М фосфатний буферний розчин з рН 7,0 (20:80), витрата 1,2 мл/хв, тиск 12 МПа, температура 25 В° С, детектор Уф (280 нм), проба 20 мкл: 1 - кофеїн
з новими розчинниками і при зміні складу розчинника, що дозволяє переходити від однієї методікікі до іншої з використанням однієї і тієї ж колонки, а
також широко застосовувати градієнтне елюювання з швидким відновленням рівноваги сорбенту з вихідним розчинником. p> Сорбенти дають можливість використовувати розчинники в широкому діапазоні властивостей, а також добавки різних типів (солі, кислоти та основи, іон-парні реагенти, органічні модифікатори). p> Регенерація розчинників високої чистоти може бути здійснена з використанням чіткої ректифікації. Забруднене сорбент у колонці може бути промитий і приведений знову в робочий стан при прокачуванні через колонку розчинників, що видаляють забруднення.
Проте в обернено-фазною хроматографії існують і деякі проблеми, які потрібно приймати до увагу і які часто ускладнюють, особливо для початківців, використання методу. p> Насамперед, характеристики утримування і селективності для звернення-фазних сорбентів міняються не тільки при переході від сорбенту одного виробника до сорбенту іншого (наприклад, від сферісорба ОДС до партісілу ОДС), формально визначених як ідентичні (Силікагель з п рівітим октадецілсіланом). p> Ці характеристики змінюються більш-менш значно навіть при переході від однієї партії сорбенту до іншої партії того ж виробника. p> Проблема ця була відзначена ще на самому початку виробництва і застосування звернення-фазних сорбентів, проте вона не вирішена і до теперішнього часу в повному обсязі.
Для щеплення фаз, які далі називають однаково, застосовують різні агенти, при цьому їх чистота (технічних сортів, які використовуються для виробництва) також різна. p> Напри заходів, для отримання прищепленої фази ОДС (октадецілсілан) використовують
В
Рис. 9. Хроматограмма суміші полібромсодержащіх антипіренів, отримана на колонці розміром 250х4, 6 мм з зорбаксом ОДС, рухома фаза - метанол, витрата 1 мл/хв, детектор-УФ (254 нм), проба 10 мкл: 1 - гексабромбутен-2, 2 - гексабромбензол; 3,4 - домішки; 5 - декабромдіфенілоксід
октадецілтріхлорсілан, метілоктадецілдахлорсілан і диметил-октадецілхлорсілан. Якщо використовують ді-або три-функціональні силани, то залежно від ст...
